外源物质SNP,Spd对盐碱胁迫下射干幼苗伤害缓解作用的研究.docVIP

外源物质SNP,Spd对盐碱胁迫下射干幼苗伤害缓解作用的研究 重庆三峡库区植物生态与资源重点实验室，重 庆 400715) ［摘要］为了盐碱地开发利用及射干的栽培管理 提供理论依据，该实验通过外施外源物质SNP, Spd 来缓解 NaCI, Na2SO4, NaHCO3, Na2CO3 4 种盐的 摩尔比为9 ： 1 ： 9 ： 1,盐浓度为100 mmol?L-l的混 合盐碱胁迫对射干幼苗造成的伤害，实验结果显示高 pH胁迫是造成盐碱胁迫的主要因素，时间和各处理浓 度之间有交互作用，盐，碱胁迫之间有协同效应。在 100 mmol?L-l的盐碱胁迫下射干幼苗叶片中质膜过氧 化指标(MDA, 0-?2)和代谢产物(可溶性蛋白，可 溶性糖，有机酸)的含量均呈现不同程度的上升趋势。 经过不同浓度的SNP, Spd处理后，MDA和0-?2显著 降低，并且有效提高了代谢产物的含量，其中SNPC0.05 mmol?L?l)和Spd(0.5 mmol?L-l)缓解伤害效果最佳。 研究结果说明SNP, Spd能有效缓减盐碱胁迫对射干 幼苗的伤害，提高射干幼苗的耐盐碱能力，从而为盐 碱地的利用和射干种植提供科学基础。 ［关键词］盐碱胁迫;外源物质;射干幼苗;伤害缓解; 生理生化指标 ［收稿日期］2014-05-27 ［基金项目］国家自然科学基金项目 ［通信作者］*何平，教授，博士生导师，Tel: (023) E-mail： HYPERLINK mailto:hepingl96373@126.comhepingl96373@126.com ［作者简介］徐梦平，硕士研究生，Tel: E-mail： HYPERLINK mailto:Iliu2qian3han@163.comIliu2qian3han@163.com 射干 Belamcanda chinensis (L.) DC.为莺尾科多 年生草本植物，是目前市场上紧缺的名贵中药材之一 ［l］o近年来发现射干耐盐碱，利用耐盐碱的植物对土 壤盐碱化进行改良是在众多的生物措施中最为生态科 学的⑵。选择耐盐碱的植物，了解植物的耐盐碱机制， 以及怎样提高植物的耐盐碱性已成为当务之急，许多 学者研究证明目前利用外源物质提高植物的抗逆性是 一条非常有用的途径。本实验选用外源物质SNP, Spd 对盐碱胁迫下射干幼苗进行恢复，以明确射干对盐碱 胁迫缓解的适宜浓度，从而为盐碱地的利用以及射干 开发与改良提供理论依据。 1材料 供试的射干种子由河北安国胜利药材种子市场提 供，经何平教授鉴定为B. chinensis的干燥成熟种子。 Spd为Sigma公司生产，外源一氧化氮供体硝普钠（SNP） 由韩国KAIST提供。 2方法 每盆留长势整齐且健壮的4株幼苗，待其长至三 叶一心时。选择经预实验证明的较为合适的浓度即 NaCI, Na2SO4, NaHC03, Na2CO3 4 种盐的摩尔比 为9 ： 1 ： 9 ： 1,盐浓度为100 mmol?L-l溶液胁迫处 理射干幼苗，并用SNP, Spd2种外源恢复物质来做恢 复实验，每种物质共设计6个处理梯度，包括空白对 照组CK1、混合盐胁迫对照组CK2、不同浓度SNP处 理组T1?T4,不同浓度Spd处理组T5?T8,见表1。 每处理设置3个重复，每隔2 d向花盆内添加恢复液 直到花盆里面的土淋透为止。分别在盐碱胁迫后第10, 20, 30天取样测定，测量O-?2, MDA,可溶性蛋白， 可溶性糖时均称取0.3 g鲜叶用于酶液提取，测量3 种有机酸时准确称取0.1 g干样进行HPLC的样品制备。 叶片中丙二醛（MDA）含量测定方法参照Velikova 等的硫代巴比妥酸（TBA）检测法[3];用轻胺氧化反应 测定0-?2含量⑷;可溶性蛋白值采用张志良的方法测 定⑸;可溶性糖含量采用蔥酮比色法测定⑹;高效液相 色谱法测量幼叶及根中3种有机酸含量：岛津高效液 相色谱仪（LC-20）,草酸、柠檬酸、丁二酸对照品购 于国家标准物质中心（HPLC298%）。色谱条件： Phenomenex C18 柱（4.6 mmX250 mm，5 ?m）;流 动相为甲醇-NaH2PO4 （3 : 97）,用磷酸 表1对射干幼苗处理的不同组合 Table 1 Belamcanda chinensis seedlings treated by differe nt combi nations 处理 NaCI?Na2SO4?NaHCO3? Na2CO3 （9 ： 1 ： 9 ： 1） SNP /mmol?L-lSpd /mmol?L-l CK1000 CK210000 T11000.50 T210010 T31000.250 T4100