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海绵动物保存及 DNA 提取方法的研究
龚 琳, 欧徽龙, 王德祥, 柯才焕, 李文宇
( , 361005)
摘要: 海绵标本长期、完整的保存是开展海绵分类学及分子进化研究的重要前提, 本研究以建立通用
的海绵动物标本的保存方法及快速、完整的基因组 DNA 提取方法为主要目的, 通过对硅质的山海绵
(Mycale sp.)和钙质的白枝海绵(Leucosoleniidae sp.)为材料进行–20 ℃冰冻、乙醇固定、冰冻后风干和乙
醇固定后风干等 4 种保存方法进行研究, 同时采用酚-氯仿法、高盐法、CTAB 法等 3 种基因组 DNA
提取方法, 测试了4 种保存方法的DNA 提取效率。实验结果显示, 海绵样品的4 种保存方法以及3 种
DNA 提取方法对于硅质海绵以及钙质海绵虽然在提取的 DNA 得率上有差异, 但都能获得较高纯度基
因组DNA 。从经济成本、方便性、潜在的污染等因素考虑, 高盐法是首选的提取海绵基因组DNA 的
方法; 乙醇固定保存的海绵样品DNA 得率最高, 冰冻的海绵样品得率最低, 推荐采用乙醇固定保存海
绵样品的方法。
关键词: 海绵; DNA 提取; 保存
中图分类号: Q33; Q959.12 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2013)09-0037-06
, DNA ,
[1] [2]
15 000 , 5 000 20 ,
50 , ,
, , DNA
,
[2] [3]
,
[4] ,
[5] 1 材料与方法
, 1. 1 材料
,
(Mycale sp.)
,
, 3
(Leucosoleniidae sp.),
:
DMSO [6] −20 ℃95%95%
4 ,
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