抗阿米巴菌在阿米巴中存活和增殖的观察研究-流行病与卫生统计学专业毕业论文.docxVIP

常用缩麝语list 常用缩麝语list of abbreviations and symbol 缩略语 英文全称 中文 ARB Amoeba-resisting Bacteria 抗阿米巴细菌 AS Amoebal Saline 阿米巴生理盐水 BCYE Buffered Charcoal Yeast Extract 缓冲炭粉酵母浸膏琼脂 CAP Community Acquired Pneumonia 社区获得性肺炎 EB Elementary Bodies 原体 FLA Free-Lliving Amoeba 自由生活阿米巴 HAP Hospital Acquired Pneumonia 医院获得性肺炎 LLAP Leionella-like alalOebal pathogens 军团菌样阿米巴胞内菌 Lp Legionella pneumophila 嗜肺军团菌 NNA Non-nutrient Agar 无营养琼脂平板 PYB peptone-yeast-glucose broth 蛋白胨酵母肉汤 RB Reticular Bodies 网织体 Giemsa 吉姆萨(染色) G-imenez 吉曼尼兹(染色) 主要试剂与培养基的配制主要试剂与培养基的配制 主要试剂与培养基的配制 主要试剂与培养基的配制 1．PYB712培养基 基础母液 Prote。se pept。ne 20．0 g Yeast extraet 1．0 g 蒸馏水 900 ml 2M葡萄糖液 } 葡萄糖 18．0 g | 柠檬酸钠 1．0 g } 蒸馏水 50，0 ml 712：prepare and sterilize separately each of the following components and add directly to the basal medium． 基础母液 900 ml 0．4M MgSO。．7H,O 10．0 ml 0．05M CaCI 8．0 ml 0．005M Fe(NH)：(S吼)：．6心O lO．o ml 0．25M Na2HP仉．7地O i0．0 ml 0．25M K心P04 lO．0 ml 2M葡萄糖液 50．0 ml 将上述液体分另Ij灭菌后(除葡萄糖液需过滤除菌外，余皆121C灭菌20min。) 混合加入母液，调节PH至6．5。 主要试剂与培荐基的配制2．BCYE培养基 主要试剂与培荐基的配制 2．BCYE培养基 N．2一乙酰胺基．2一氨基乙烷磺酸(ACES) lO．00 g 氢氧化钾片(85％KOH) 2．80 g 活性炭 1．50 g 酵母浸膏 10．00 g 琼脂 17．00 g Q一酮戊二酸 1．00 g L_半胱氨酸盐酸盐(溶于10ml蒸馏水中) 0．40 g 焦磷酸铁(溶于10ml蒸馏水中) 0．25 g 蒸馏水 1000 ml 将ACES加入到烧瓶中的900ml蒸馏水中，放50℃水浴中约lh，直到ACES 完全溶解。将KOH加到ACES溶液中。将干燥的活性炭、酵母浸膏、琼脂、n一 酮戊二酸加入溶液中，充分混合，再加入80ml的蒸馏水。高压121℃15rain。在 50℃水浴中冷却后加入经分别过滤除菌(0．22urn孔径滤膜)的焦磷酸铁和L一半 胱氨酸盐酸盐。检查和调整PH，使在6．85—6．95(于40℃)，如需矫正时使用lmol／L HCL或KOH溶液。浇注平板。放36℃1天作预培养，以检出污染的平板。将未污 染的平板置塑料袋中密闭，4。C可放2个月。 3．阿米巴生理盐水(AS) NaCl 120 mg MgS0‘．7H20 4 mg CaCl 2．2H20 4 mg Na口HP04 142 mg KH2P0。 136 mg Distilled water 1000 ml 121。C 15min灭菌，调节PH 6．8，4 0C可保存6个月。 主要试剂与培养基的配制4．无营养琼脂平板(NNA) 主要试剂与培养基的配制 4．无营养琼脂平板(NNA) 121℃15min灭菌，60 4C浇琼脂平板 5．PBS缓冲液 solution l Na2HP仉 2．84 g K地P0． 0．272 g Distilled water 500 ml 121℃20min灭菌 S01ution 2 MgSo‘，7H,0 8．0 g CaCl2．2也0 8．0 g NaCl 0．24 g I DistilIed water 500 ml 121℃20min灭菌 混合solution l2，冷却至室温。 6．Gimenez染液 ①复红染液 甲液 混合10％碱性复红酒精溶液(109碱性复红溶于 100m195％酒精)100ml，4％石炭酸溶液(100ml石 炭酸加入