黄连素对TNF-α诱导的人外周血单核细胞源树突状细胞免疫成熟的影响-老年医学专业毕业论文.docxVIP

华中科技大学硕士学位论文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE 1 PAGE 1 中英文缩写对照表 英文缩写 英文全称 中文名称 AS Atherosclerosis 动脉粥样硬化 DC Dendritic Cell 树突状细胞 PBS phosphate buffer saline 磷酸盐缓冲溶液 BSA bovine serum albumin 小牛血清白蛋白 FCS fetal calf serum 胎牛血清 MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-dip 噻唑蓝 -henyltetrazolium bromide DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 OD optical density 吸光度 TNF-α tumor necrosis factor alpha 肿瘤坏死因子α ELISA PBMC enzyme-linked immunosorbent assay peripheral blood mononuclear cell 酶联免疫吸附试验 外周血单个核细胞 FCM PBL VALT APC Flow Ctyometry Peripheral Blood Lymphocyte vascular associated lymphoid tissue antigen presenting cell 流式细胞术 外周血淋巴细胞 血管相关性淋巴样组织 抗原递呈细胞 LC MMC HRP 1angerhans cells mitomycin c horse radish peroxidase 朗格罕斯细胞 丝裂霉素 C 辣根过氧化物酶 rhGM-CSF Recombinant human macrop 重组人巨噬细胞集落刺激因子 hages stimulating factor rhIL-4 Recombinant human interleukin 4 重组人白细胞介素 4 rhTNF-α recombinant human tumor necrosis factor alpha 重组人肿瘤坏死因子α NLR NOD-like recepter NOD 受体 TLR Toll-like receptor Toll 样受体 PTCA Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty 冠状动脉成形术 INF-γ interferon gamma 干扰素γ IL-12 interleukin 12 白介素 12 IL-10 interleukin10 白介素10 MLR mixed lymphocyte reaction 混合淋巴细胞反应 UAP unstable angina pectoris 不稳定型心绞痛 MDC Myeloid dendritic cells, 髓样树突状细胞 PDC Lymphoid dendritic cells 淋巴样树突状细胞 ox-LDL oxidized low density lipoprotein 氧化低密度脂蛋白 VDC vascular dendritic cell 血管树突状细胞 黄连素对 TNF-α 诱导的人外周血单核细胞源树突状细胞 免疫成熟的影响 华中科技大学同济医学院附属协和医院老年病科 430022 硕士研究生 ： 孙永霞 导 师 ： 管思明教授 中文摘要 目的 研究黄连素对 TNF-α 诱导的人外周血单核细胞源树突状细胞成熟的影 响，探讨黄连素抑制 AS 的免疫学机制。 方法 采集健康志愿者外周血，利用淋巴细胞分离液（ficoll）密度梯度离心法 分离获得人外周血单个核细胞（PBMC），用贴壁法分离淋巴细胞和单核细胞。 单核细胞在含重组人巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）和重组人白细胞介素 4（rhIL-4）的含 10%胎牛血清（FCS）的 RPMI1640 完全培养液中培养 7 天后， 获得未成熟树突状细胞（DC），分为三组：（1）正常对照组（PBS 组），加入 PBS； （2）TNF-α 组，加入重组人肿瘤坏死因子α （rhTNF-α ）；（3）黄连素+TNF- α 组，加入黄连素及 rhTNF-α 。继续培养至第 10 天。采用流式细胞术检测 DC 表型 CD11c、CD83、CD86、HLA-DR ，酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中 白细胞介素-12 (IL-12）、干扰素-γ （INF-γ ）的浓度，同种异体混合 T 淋巴细胞 反应检测 DC 对 T 淋巴细胞增殖能力的影响，辣根过氧化酶(HRP)内吞实验检测 其 DCs 群体内吞能力。 结果 与正常对照组相比，TNF-α 组 CD11c、CD83、CD86、HLA-DR 的表