曼地亚红豆杉枝叶中活性成分的含量测定研究-药物化学专业毕业论文.docxVIP

目 录 摘 要 - 1 - Abstract - 3 - 前 言 - 5 - 第一部分 曼地亚红豆杉枝叶中活性成分提取及除杂工艺研究 - 7 - 1 实验材料 - 8 - 1.1 仪器与试药 - 8 - 1.2 对照品及药材 - 8 - 2 实验方法 - 8 - 2.1 提取溶剂的选择 - 8 - 2.2 提取方法的选择 - 9 - 2.3 除杂方法的优化 - 17 - 3 结果与讨论 - 19 - 第二部分 曼地亚红豆杉枝叶中活性成分的含量测定方法研究 - 20 - 1 实验材料 - 20 - 1.1 仪器 - 20 - 2 实验方法 - 21 - 2.1 色谱条件的考察 - 21 - 2.2 方法学考察 - 22 - 3 结果与讨论 - 24 - 第三部分 曼地亚红豆杉枝叶中活性成分的含量变化研究 - 26 - 1 实验材料 - 26 - 1.1 仪器 - 26 - 1.2 试药 - 26 - 2 实验方法 - 27 - 2.1 含量测定方法 - 27 - 3 结果与讨论 - 28 - 3.1 含量测定结果 - 28 - 4 小结和讨论 - 31 - 4.1 小结 - 31 - 4.2 讨论- 31 - 第四部分 曼地亚红豆杉与南方红豆杉针叶挥发性成分的 GC-MS 分析 - 32 - 1 实验材料- 32 - 1.1 仪器- 32 - 1.2 样品- 32 - 2 实验方法- 32 - 2.1 挥发油的提取- 32 - 2.2 GC-MS 工作条件 - 32 - 3 结果与讨论- 33 - 3.1 GC-MS 分析结果 - 33 - 总 结- 36 - 参考文献- 37 - 致 谢- 39 - 附 录- 40 - 附录 1 附图- 40 - 附录 2 文献综述- 50 - 附录 3 在校期间论文情况- 62 - 摘 摘 要 曼地亚红豆杉枝叶中活性成分的含量测定研究 曼地亚红豆杉枝叶中活性成分的含量测定研究 - - PAGE 1 - - - PAGE 2 - 摘 要 目的：本研究对曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇、三尖杉宁碱和 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的 提取分离工艺和含量测定方法进行了系统研究，并分析了不同采收期、不同生长年限 和不同采集地曼地亚红豆杉枝叶中这 3 种目标成分含量的变化规律。最终建立了曼地 亚红豆杉枝叶中紫杉醇、三尖杉宁碱和 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的质量控制方法。另外，本 实验还对曼地亚红豆杉和南方红豆杉针叶中的挥发性成分进行了比较分析，为曼地亚 红豆杉这一珍稀药用资源的有效利用奠定基础。 方法：(1)对浸提法和超声提取法分别进行单因素实验优化，而后利用正交实验分 别对这两种提取方法进行优化，比较优化后两种提取方法的提取液中紫杉醇 10-去乙酰 巴卡亭Ⅲ的含量以及其他工艺参数，从而确定一种曼地亚红豆杉枝叶的最佳提取工艺。 (2)通过正交实验法对提取液中的紫杉烷类成分的萃取工艺进行了优化研究。(3)对用于 曼地亚红豆杉枝叶中的紫杉醇、三尖杉宁碱和 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量测定的 UPLC 法 进行色谱系统优化和方法学考察。(4)采用 UPLC 法对不同采收期、不同生长年限和不 同采集地的曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇、三尖杉宁碱和 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量进行 测定分析，并研究了不同样品中 3 种目标成分含量的变化规律。(5)采用水蒸气蒸馏法 分别提取曼地亚红豆杉和南方红豆杉针叶中的挥发油后，利用 GC-MS 法对其挥发性成 分进行了分离鉴定。 结果：(1)超声提取法比浸提法明显优越，在将目标成分提取完全的情况下，采用 超声提取，不仅节约时间和溶剂，而且提高效率。超声提取法的最佳工艺如下：提取 温度在 35~45℃之间，料液比为 1:30，提取时间为 30min，提取次数为 3 次。 (2)分离除杂优化工艺为，用石油醚进行脱色除杂，每次 30mL，直至石油醚萃取物近无 色后。残渣中加入 15mL 的蒸馏水和 30mL 二氯甲烷继续萃取，然后再用 30mL 二氯甲 烷萃取两次，收集二氯甲烷萃取液，45℃下减压真空浓缩即可。(3) 优化后的色谱条件 如下：Acquity BEH Shield RP18 色谱柱( 2.1 mm×100 mm, 1.7 μm )；流动相为水-乙腈 (A-B)， 梯度洗脱( 0 ~ 8 min, 78 % A; 8 ~ 11 min, 78 % A → 65 % A, 11 ~ 44 min, 65 % A)；流速为 0.2 mL· min-1，柱