流式细胞原理.pdf

流式细胞仪原理流式细胞仪原理 BDBD 生物科学生物科学 郭立琳 1350109742513501097425 流式细胞术的基本概念流式细胞术的基本概念 流式细胞术流式细胞术 （（FlowFlow CytometryCytometry, 简称简称FCMFCM））是是一种可以快种可以快 速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞） 的多项特性的多项特性，并加以定量的技术并加以定量的技术，同时可以对特定群体同时可以对特定群体 加以分选 研究对象为生物颗粒研究对象为生物颗粒，如各种细胞如各种细胞、微生物及人微生物及人工合成合成 微球等 研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定 量 BD Biosciences Immune Function BD Biosciences Immune Function BD Biosciences Immune Function 散射光信号散射光信号 Right Angle Light DetectorDetector αCell Complexity SSC Laser FALS Sensor Incident Forward Light Detector Light αCell Surface Area Source FSCFSC 前向角散射光向角散射光 （FSC,, Forward Scatter） 细胞相对大小及其表面积 侧向角散射光（SSC, Side Scatter） 细胞粒度及细胞内相对复杂性 BD Biosciences Immune Function 外周全血细胞散射光双参数点图 颗粒杂质、气泡 （（红细胞溶解后红细胞溶解后）） 对检测的影响 BD Biosciences Immune Function 流式细胞仪的检测信号流式细胞仪的检测信号 荧光信号 • 使用荧光标记的单克隆抗体染色，做多色分析 • 荧光信号的强弱，反映了细胞抗原的表达含量 BD Biosciences Immune Function 荧光信号荧光信号 双色直接染色双色直接染色 BD Biosciences Immune Function 荧光信号荧光信号 BD Biosciences Immune Function 数据分析数据分析 数据存储: LIST MODE 数据显示: