冷冻和冷休克对精子生物学特性和线粒体膜电位的影响-养殖专业论文.docxVIP

本论文已达到农学硕士学位论文要求答辩委员会主席 本论文已达到农学硕士学位论文要求 答辩委员会主席 答辩委员会委员 答辩委员会委员 答辩委员会委员 答辩委员会委员 延边大学 20 1 6钲f-蝴舛日 万方数据 学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成果。尽我所知， 学位论文独创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成果。尽我所知， 除了文中特别加以标记和致谢的部分外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果， 也不包含本人为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的材料。与我一同工作的同事对本 研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 本人如违反上述声明，愿意承担由此引发的一切责任和后果。 研究生鲐簖慨 塑凼生生月至堇旦 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下所完成的学位论文，学校有权保存其电子和纸制文档，可以借阅或上 网公布本学位论文的全部或部分内容，可以向有关部门或机构送交并授权其保存、借阅或上 网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密论文，按保密的有关规定和程序处理。 1．保密o，在 年解密后适用于本声明；2．不保密O。 研究生张婚翩蜘名， 万方数据 延边大学硕士论文摘要 延边大学硕士论文 摘要 低温冷冻保存是目前进行精子保存和体外受精试验以及动物保种的关键技 术，近年来也成为猪繁殖辅助技术中研究的重点内容，可以进行精液的长期冷冻 保存，运输与体外受精。本试验的研究目的是为了探讨冷冻和冷休克处理对猪精 子生物学特性、线粒体膜电位(Mitochondrial inner transmembrane potential，△Ym)、 精子粘附性以及体外受精率的影响。使用的主要方法是微生物动(静)态图像检 测系统，计算机辅助精子精液分析(computer assisted sperm analysis，CASA)和考马 斯亮蓝染色方法、低渗膨胀方法(Low hypo—osmotic swelling test，HOST)，JC一1 (Mitochondrial membrane potential assay kit with JC．1)染色，猪精子粘附性镜检 等。经过多次试验研究得出以下结果： 1．CASA检测．196℃冻融精子的质量参数显著高于-80℃冻融精子和冷休克 处理的精子； 2．．196℃冻融精子在进行体外受精试验时发育到二细胞期的比率好于．80℃ 冻融精子和冷休克处理的精子； 3．经低渗HOST试验，表明．196℃冻融精子的尾部卷曲比率与顶体完整性高 于．80℃冻融精子和冷休克处理的精子； 4．．196℃冻融精子与卵母细胞的粘附力好于．80℃冻融精子和冷休克处理的 精子； 5．25℃、．80℃和．196℃添加CLC组的精子线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential，A、Pm)均高于未添加p一环糊精包合物(p—entrapped cyclodextrin complex．CLC)各组精子的线粒体膜电位，且在．196℃时添加CLC处理组的线粒 体膜电位值最高。 关键词：猪精子：冷冻；冷休克：低渗；膜电位 万方数据 延边大学硕士论文Abstract 延边大学硕士论文 Abstract Sperm cryopreservation is the key technology to save sperm，In vitro fertilization and animal breed conservation．It has become a key content in the pig assisted reproductive technology in recent years．It can conduct long-term semen cryopreservation,transportation andⅣF．The research explored freezing and cold shock sperm the biological characteristics，mitochondrial membrane potential，sperm adhesive property,the effect ofⅣF rate．Using the main method of microbial dynamic (static)state image detection system，coomassie brilliant blue staining method,low hypo—osmotic swelling test(HOST)，JC一1(Mitochondrial memb