流式细胞术检测CsA及FK506对肾移植患者Th亚群的影响-临床检验诊断学专业论文.docx

独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位诘文作者签名： 翕复 签字日期： 竺里星年』月丑日 学位论文版权使用授权书本学位沦文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使 学位论文版权使用授权书 本学位沦文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使 用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机构 送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权 大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论 文。 论文作者签名：指导教师签名：三多睁高盈 乙／ ／ 签字日期：鲨丛年』月卫El 流式细胞术检测CsA及FKS06对肾移植患者n亚群的影响硕士研究生：高 流式细胞术检测CsA及FKS06对肾移植患者n亚群的影响 硕士研究生：高 勇 指导教师：安万新教授 专业名称：临床检验诊断学 摘 要 目的：通过与健康人群比对分析，研究肾移植患者术后Thl细胞和 Th2细胞的分化情况以及两种抗排斥药物(CsA，FK506)对Thl细胞和Th2 细胞的影响，了解这两种常用的钙调磷酸酶抑制剂免疫调节作用的异 同，以求正确评估两药在抗排斥反应的差别，为患者预防排斥反应及 为肾移植术后制定更加合理的免疫抑制方案提供实验依据。 方法：分成三组：健康对照组(n=48)、CsA组(n=21)、FK506组 (n=22)。抽取静脉全血，以肝素钠抗凝，用佛波酯(PMA)和离子霉素 (Ionomycin)束0激T淋巴细胞4小时，用荧光标记的抗CD3和CD8单克 隆抗体与T细胞表面上相应的抗原分子相结合，溶血、通透后加入抗 IFN．Y与IL．4抗体，同含相应细胞内抗原的淋巴细胞相结合。运用流 式细胞仪选定CD3+淋巴细胞，再以CD3+淋巴细胞设门，门内用CD8 与IFN．丫或CD8与IL．4分别建立双参数直方图，找出CD3+／CD8-／ IFN．丫+细胞(Thl细胞)和CD3+／CD8．／IL．4+细胞(Th2细胞)。以百分率 表示Thl和Th2占总T细胞比率。结果使用SPSSl2．0软件进行统计分 析，以均数±标准差描述Thl细胞和Th2细胞分化情况，并分析CsA与 FK506两种免疫抑制剂对肾移植患者Thl和Th2细胞的影响。 结果：1．所有肾移植患者Thl细胞占总T细胞的百分率(14．25+_2．10) 低于健康对照组Thl细胞百分率(15．76±2．74)，与健康对照组对比有明显 差异(P<0．05)。FK506药前的Thl细胞百分率(13．54±2．20)明显低于健康 对照组，与健康对照组有非常显著的差异(P<0．05)，但CsA药前的Thl 细胞百分率(14．99±1．73)减少的不明显，与健康对照组无显著性意义(P >O．05)，并且FK506药前Thl与CsA药前的Thl百分率相比有显著性意义 (P<0．05)。所有肾移植患者Th2细胞百分率(1．15±O．45)、CsA药前 Th2(1．19±0．56)、FK506药前Th2细胞百分率(1．1 2±0．33)稍低于健康对 照组(1．28 4-0．56)，但几组之间无显著性意义(P>0．05)。2．CsA药后 Thl(8．48±1．01)与FK506药后Tht(8．16±1．51)都有明显下降，但二者比 Thl(8．48±1．01)与FK506药后Tht(8．16±1．51)都有明显下降，但二者比 较无显著性意义(，P>0．05)；CsA药后Th2(1．21±0．54)与FK506药后 Th2(1．16±0．25)相比无显著性意义(P>0．05)。3．CsA药后Thl细胞百分 率明显低于CsA药前，两者之间比较有显著性意义(P<0．05)，同样， FK506药后Thl细胞百分率也明显低于FK506药前，两者之间比较有明 显差异(P<0．05)。CsA药前与CsA药后Th2及FK506药前与FK506药后 Th2相比均无显差异佃>0．05)。4．CsA药前、药后Thl细胞百分率的差 (6．52±1．44)大于FK506药前、药后Thl细胞百分率的差(5．38±1．67)，并 且两者比较后有显著性意义fP<0．05)。 结论：1．肾移植组Th2细胞百分率与正常组比较无明显差异，说 明Th2细胞分化可能不受CsA与FK506的影响。2．CsA及FK50