微生物工程(发酵)第二章菌种制备原理以及创新技术.pptVIP

高通量筛选技术： 2.3 微生物原生质体育种和基因组改组育种 2.3.1 原生质体的特征 对外界变化更敏感； 对诱变剂更敏感； 对某些噬菌体失去敏感； 2.3.2 微生物原生质体再生育种 ①出发菌株的选择 ②菌体的活化 ③原生质体的制备 ④原生质体再生 ⑤菌株的分离 ⑥筛选 原生质体的制备： 酶解法 预处理： 细菌（青霉素）；放线菌（甘氨酸）； 霉菌（脂肪酶）；酵母菌（EDTA或巯基乙醇） 置于稳定剂中； 酶的选择 ： 放线菌、细菌（溶菌酶） 霉菌 （蜗牛酶或纤维素酶） 酵母 （蜗牛酶或葡聚糖酶） 原生质体再生（细胞壁） 双层平板上，半固体培养基中； 2.3.3 微生物原生质体诱变育种 原生质体技术＋诱变育种技术 出发菌株的选择 菌体的活化 原生质体的制备 诱变育种 原生质体再生 菌株的分离 筛选 2.3.4 微生物原生质体转化技术 整条染色体DNA、片段DNA或者质粒DNA转化原生质体获得转化子的育种技术； 出发菌株的选择 菌体的活化 原生质体的制备 转化 原生质体再生 菌株的分离 筛选 2.3.5 微生物原生质体融合技术 用物理、化学或生物学的方法处理两亲株原生质体，促使其融合，经染色体交换、重组而达到杂交的目的，通过筛选而得到集二者优良性状于一体的稳定融合子； 出发菌株的选择（具有较大遗传差异的近亲菌株） 菌体的活化 原生质体的