荧光PCR系列产品操作培训资料.pptVIP

样本保存 样本采集后，如若不能马上检测，应将样本置于冰箱4℃存放，并在一周时间内检测。应避免反复冻融。 一周后检测的标本应保存在-20 ℃。 棉拭子样本应在真空管中保存，要操作前再加生理盐水/细胞保存液进行洗脱。 DNA提取 取800ul样本离心得沉淀 ↓ 加入细胞裂解液50ul，煮沸10min ↓ 12000离心10min即可上机 若肉眼未见沉淀，可增加取样量，再次离心收集沉淀； 若沉淀杂质较多，可用细胞保存液洗涤1-2次； 血液多样本，用蒸馏水洗涤1-2次； 粘液多样本，取样时尽量去除粘液。 应注意防止爆盖： 金属浴可压重物（冰盒、冰袋等） 水浴应采用螺旋管盖的离心管 确保离心管质量合格 优点：简单、快捷、方便。 缺点：HPV DNA纯度较差，含有血红素、蛋白、脂类等PCR抑制剂。 针对泌尿生殖道样本（棉拭子样本），先用细胞保存液/生理盐水洗脱，收集沉淀，而后与上述操作一致 PCR试剂配制 PCR MIX（μl） Taq 酶（μl） DNA 模板（μl） 1人份量 17.5 0.5 2/人份 10人份量 175 5 2/人份