荧光光度分析法测定维生素B.pptVIP

* OBJECTIVE 1 学习和掌握荧光光度分析法测定VB2的基本原理和方法。 2 学习荧光分光光度计的使用方法。 PRINCIPLE 荧光：物质的分子经紫外光照射后，发射出的较原来吸收 光的频率低、波长长的光。不同的荧光物质有各自 的特征激发光波长和荧光波长，利用物质的荧光现 象进行定性、定量分析的方法称为荧光分析法。 对同一物质而言，若εbC ＜ 1（＜0.05），即溶液的组 成量度极稀时， 荧光强度F与溶液的组成量度C有以下关系：　 F=2.303ФI0εbC　 Ф：荧光效率 I0 ：入射光强度 ε: 荧光物质的摩尔吸光系数 b：样品池的厚度 ＜ I0 和 b 当 固定时， F=K’C 0 F C C样品 F=K’C F样品 VB2的C（HAc）=0.1mol/L溶液在紫外光照射下，发出黄 绿色荧光，可直接进行荧光测定。 pH=2.9, λ激发 370nm，467nm λ发射 527nm VB2 ，核黄素 PROCEDURE 1 维生