研究中常用荧光染料和探针.pptVIP

荧光细胞化学样品制备和检测技术 什么是显微镜荧光检测？ 一般荧光显微镜荧光观察，是借标本: 1）本身的荧光反应物质吸收荧光光源发出的激发光能而呈现的荧光现象，或 2）利用组织及细胞内某成分可与荧光染料（荧光色素）结合并受到荧光激发后所出现特定颜色的荧光供作观察。作出定性、定位（根据荧光图象的形态学特征和颜色）和定量（根据荧光的亮度）。 其中：1）为自发荧光，2）为继发荧光。 落射荧光与透射光观察的区别 落射荧光与透射光观察的区别 什么是荧光 ? 物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态，再回到低能状态时释放出的光，是非温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光，发射出的长波光。 显微镜荧光利用光源激发——光化荧光 荧光的性质 荧光显微镜的优点和用途 标本制作的顺序 组织固定、取材、组织脱水、包埋、切片、染色、封片 培养的悬浮细胞、粘附细胞 组织固定 活体组织一旦停止血液循环和物质代谢就会因物质代谢障碍产生一系列的生物化学和组织学改变，并导致形态学上可见的细胞器变化和细胞组织的形态改变直至腐败自溶。 选择最佳固定液标准是： （1）最好地保持细胞和组织的形态结构； （2）最大限度地保存抗原的免疫活性。一些含重金属的固定液在免疫组化和细胞化学技术中是禁用的； （3）不要用可能带有自发荧光的固定剂，如带有苦味酸的固定剂，还有甲醛升汞固定液，会使上皮细胞产生非特异性荧光； （