水稻黄嘌呤脱氢酶基因OsXDH克隆及表达分析-南方农业学报.pdf

南方农业学报 JournalofSouthernAgriculture 2017，48（12）：2113-2121 ·2113 · 12期 ISSN2095-1191；CODENNNXAAB DO ：10.3969/j.issn.2095-1191.2017.12.01 水稻黄嘌呤脱氢酶基因OsXDH克隆及表达分析 1 1 1 1 1 2 1* 韩瑞才 ，武志峰 ，唐双勤 ，潘晓华 ，石庆华，王根发 ，吴自明 1 2 （江西农业大学 教育部作物生理生态与遗传育种重点实验室，南昌 330045 ；江西省吉安市种子管理局， 江西 吉安 343000） 摘要：【目的】克隆水稻黄嘌呤脱氢酶（Xanthine dehydrogenase ，XDH ）基因（OsXDH），分析其生物信息学特性及 表达特性，为研究XDH在水稻生长发育和响应逆境胁迫中的调控机制提供理论依据。【方法】以粳稻品种日本晴为材 料，采用同源克隆技术克隆OsXDH基因，应用生物信息学方法对其氨基酸序列进行分析。利用实时荧光定量PCR （qPCR ）检测OsXDH基因的组织表达特性及逆境胁迫下的表达情况，并对不同转基因株系乳熟期剑叶OsXDH 基因表 达量、XDH活性和叶绿素含量进行比较分析。【结果】克隆获得OsXDH基因的开放阅读框序列（ORF ）（GenBank登录 号LOC4333171 ），其长度为4110 bp ，编码1369个氨基酸。OsXDH蛋白分子量大小为150.23 kD ，理论等电点（pI ）为 6.54 ，与小麦、高粱、玉米、谷子和油菜等作物XDH蛋白氨基酸序列的相似性分别为84.54%、84.07%、81.52%、76.35% 和69.22% ，表明XDH蛋白氨基酸序列具有高度保守性。OsXDH基因在水稻不同组织部位均有表达，灌浆期的表达量 显著高于苗期和分蘖盛期（P0.05 ），且受干旱、黑暗、高温和盐胁迫诱导高效表达。OsXDH过表达水稻转基因株系 乳熟期剑叶的XDH活性和叶绿素含量高于野生型，OsXDH干扰转基因株系的XDH活性和叶绿素含量低于野生型。 【结论】OsXDH基因受水稻生长发育和逆境胁迫因子诱导表达，推测其是调控水稻生长发育和响应逆境胁迫的关键 基因。 关键词：水稻；OsXDH基因；基因克隆；生物信息学；表达分析；胁迫 中图分类号：S511.03 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2017 ）12-2113-09 Cloningandexpressionanalysisforxanthinedehydrogenase geneOsXDHinrice 1 1 1 1 1 HAN Rui-cai ，WU Zhi-feng ，TANG Shuang-qin ，PAN Xiao-hua ，SHI Qing-hua ，