第十部分白细胞检验的基本方法.pptVIP

章 白细胞检验的基本方法 ;第一节 白细胞功能检验; 一、墨汁吞噬试验 【原理】 血液中中性粒细胞及单核细胞对细菌、异物等具有吞噬作用。在一定量的肝素抗凝血中，加人一定量的墨汁，经37℃温育4小时，涂片染色镜下观察吞噬细胞对墨汁的吞噬情况，并计算吞噬率及吞噬指数。 【参考值】 成熟中性粒细胞吞噬率74％±15％，吞噬指数 126±60；成熟单核细胞吞噬率95％±15％，吞噬指数313 ±86。 ;第一节;M5骨髓象的墨汁吞噬试验;二、白细胞吞噬功能试验 【原理】 分离白细胞悬液，将待测的吞噬细胞与某种可被吞噬而又易于查见计数的颗粒物质如葡萄球菌混合，温育一定时间后，细菌可被中性粒细胞吞噬，可在镜下观察中性粒细胞吞噬细菌的情况，根据吞噬率和吞噬指数即可反映吞噬细胞的吞噬功能。 ; 【参考值】 1.吞噬率（％）= 吞噬细菌的细胞数／200个（中性粒细胞）X 100％；正常人为 62 8％±114％ 2.吞噬指数＝ 200各中性粒细胞吞噬细胞总数／200个（中性粒细胞）；正常人为1.06±0.05 ; 【临床评价】 吞噬细胞分大吞噬细胞和吞噬细胞两大类。前者包括组织中的巨噬细胞和血循环中的大单核细胞，后者主要是中性粒细胞。本试验可了解中性粒细胞的吞噬功能。如吞噬率和吞噬指数增高，反映中性粒细胞吞噬异物功能的增强，常见于细菌性感染。对疑有中性粒细胞吞噬功能低下者，有帮助确诊的价值。 ;三、血清溶菌酶活性试验 【原理】 溶菌酶能水解革兰氏阳性球菌的细胞壁乙酰氨基多糖成分，使细胞失去细胞壁而破裂。以对溶菌酶较敏感的微球菌悬液为作用底物，根据微球菌的溶解程度来检测血清或尿中溶菌酶的活性。 【参考值】 血清（5－15）mg／L 尿（0－2）mg／L（比浊法） ; 【临床评价】 l . 血清溶菌酶含量增高 可见于部分急性髓细胞白血病。①急性单核细胞白血病 ②急性粒-单核细胞白血病 ③急性粒细胞白血病 2．血清溶菌酶含量减低 急性淋巴细胞白血病多数减低，少数正常。慢性粒细胞白血病血清溶菌酶含量正常，但急变时下降。 ;四、硝基四氮唑蓝还原试验 【原理】 硝基四氮唑蓝（NBT）是一种染料，其水溶性呈淡黄色。当被吞入或掺入中性白细胞后，有产生过氧化物酶的作用，可接受葡萄糖中间代谢产物葡萄糖-6-磷酸在已糖磷酸旁路代谢中NADPH氧化脱下的氢，而被还原成非水溶性的蓝黑色甲颗粒，呈点状或片状沉着在胞浆内有酶活性的部位，可在显微镜下观察并计数阳性细胞百分比。 【参考值】 正常成人的阳性细胞数在10％以下。若有 10％以上中性粒细胞能还原NBT，即为NBT还原试验阳性；低于10％则为阴性。 ; 【临床评价】 1.用于中性粒细胞吞噬杀菌功能异常的过筛鉴别和辅助诊断儿童慢性肉芽肿，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症，髓过氧化物酶缺乏症和 Job综合征，NBT还原试验阳性。 ;五、白细胞趋化性试验 【原理】 在微孔滤膜的一侧放入粒细胞，另一侧放入趋化因子（细菌毒素、补体 C3a、淋巴因子等），检测离体粒细胞潜过滤膜到达趋化因子这一侧定向移动的能力。 【参考值】 趋化指数 3 .0－3. 5 ; 【临床评价】 趋化性是粒细胞到达炎症局部所必需的。本试验是观察粒细胞向感染灶运动能力的一项重要检测方法。趋化功能异常可见于Wiskot-Aldrich综合征、幼年型牙周炎、糖尿病、烧伤、新生儿、慢性皮肤粘膜白色念珠菌病、高IgE综合征、先天性鱼鳞病、膜糖蛋白（相对分子质量 11000）缺陷症、肌动蛋白功能不全症、Chediak-Hisashi综合征。 ;Chediak-Hisashi综合征;六、吞噬细胞吞噬功能试验 【原理】 活体巨噬细胞、单核细胞在体内外均有吞噬细菌、异物的功能，在体外将细胞与异体细胞或细菌混合孵育后，染色观测其吞噬异体细胞或细菌的数量，可了解其吞噬功能。利用中药斑螫在人的前臂皮肤上发疱，造成非感染性炎症，诱使单核细胞游出血管大量聚集于疱液内，抽取疱液则成为天然提纯的吞噬细胞悬液。以鸡红细胞为靶细胞，在体外370C条件下观察吞噬细胞对鸡红细胞的吞噬消化活性，取试管内的细胞进行涂片染色和镜检并计算吞噬百分率和吞噬指数。 ; 【参考值】 吞噬百分率（62.77±1.38）％ 吞噬指数1.058±0.049