临床病原学检查.pptVIP

生化试验：如肠道杆菌进行乳糖发酵试验。 血清学试验：已知抗体测抗原或已知抗原测病人血清中相应的抗体。如玻片凝集，鉴定菌种和型。 动物试验：测定细菌的毒力、病原菌的分离和鉴定。 ②分离培养 ③血清学诊断 原理：已知抗体测未知抗原进行病原菌的鉴定或用已知抗原检测患者体液中有无相应特异性抗体和其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。 标本：双份血清标本，恢复期血清抗体效价比急性期升高≥4倍者方有意义。单份血清效价超过一定标准才有诊断意义。 种类：凝集试验、沉淀试验、中和试验、补体结合试验。 常用的血清学诊断方法 类型 诊断应用举例 直接凝集试验 伤寒和副伤寒（肥达试验）、立克次体（外斐试验）、钩端螺旋体（显微凝集试验） 乳胶凝集试验 检测脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等抗体 沉淀试验 梅毒（VDRL、RPR试验） 补体结合试验 检测Q热柯克斯体等抗体 中和试验 风湿热（抗O试验） ELISA 广泛用于病原体的诊断和流行病学调查 玻片凝集试验 试管凝集试验 酶联免疫吸附试验 ④细菌的快速鉴定 API细菌数值鉴定系统 PCR技术 * 姬姆萨染色衣原体包涵体 HSV病毒 被支原体感染的精子 梅毒螺旋体 * 检测程序 病毒感染的微生物学检查法 Diagnosis Strategy for Viral Infection * 病毒感染的微生物学检查法 ELISA for HIV antibody Microplate ELISA for HIV antibody: coloured wells indicate reactivity 病毒的数量与感染性测定 蚀斑测定：准确滴定病毒感染性的方法 蚀斑（Plaque） 每个蚀斑是由一个有感染性病毒颗粒形成，称为蚀斑形成单位（Plaque forming unit，PFU）。病毒的感染量用PFU/ml表示 50%感染量（ID50）或50%组织细胞感染量（TCID50） 不能准确地测定感染性病毒颗粒的数量 乙型肝炎的病原学诊断 A 病毒性肝炎 Hepatitis Virus 肠道传播 肠道外传播 F, TTV ? 其他 E NANB B D C 病毒性肝炎- 背景  传染源 粪便 血液/ 血源性物质/ 体液 血液/ 血源性物质/ 体液 血液/ 血源性物质/ 体液 粪便 传播途径 粪-口 经皮肤/ 经粘膜 经皮肤/ 经粘膜 经皮肤/ 经粘膜 粪-口 慢性感染 否 是 是 是 否 病毒性肝炎类型 A B C D E 基因组类型 ssRNA dsDNA ssRNA ssRNA ssRNA Hepatitis B Virus 乙型肝炎的病原体 在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染 中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8% HBV virion The infectious virion is called the DANE particle. HBV Viral Genome Organization HBsAg HBcAg HBeAg 3200 Base Pair Genome Hepatocyte receptor bindng site HBV DNA Polymerase Protein that transactivates transcriptional promotors Both comprised of HBsAg HBV nomenclature HBV: hepatitis B virus HBsAg: hepatitis B virus surface antigen HBsAb: hepatitis B virus surface antibody HBcAg: hepatitis B virus core antigen HBcAb: hepatitis B virus core antibody HBeAg: hepatitis B virus e antigen HBeAb: hepatitis B virus e antibody 抗原组成--HBsAg 位于病毒表面，是一种糖蛋白 4种亚型(adr,adw,ayr,ayw) 欧美国家: adw 我国汉族: adr 我国少数民族: ayw 判断HBV感染的指标之一 刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs 抗原组成-- HBcAg 位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内，在血清中不易检出游离的HBcAg 主要成分是蛋白质 刺激机体产生抗-HBc(非保护性抗体) 在乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者中常可检出抗-HBc 抗-HBc IgM常提示病毒处于复制状态 抗原组成--