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- 2019-06-09 发布于四川
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植物全蛋白提取方法:
TCA丙酮沉淀法、Tris-HC1法、Trizol沉淀法提取法。
1 TCA丙酮沉淀法
基于蛋白在酸或疏水条件下变性使蛋白浓缩并去除污染物原理的TCA丙酮沉淀法,最早用于小麦蛋白的提取,是目前提取植物蛋白的常用方法之一。
具有降低次生代谢物质的干扰、减少蛋白降解等优点。
TCA能有效地抑制蛋白酶对蛋白质的水解作用,保证在制样过程中蛋白质不被降解;丙酮溶液能除去样品中的酚类及色素等干扰物质,同时实验过程中采 用的高速离心办法能较好地去除多糖的影响。然而该方法的一个最大缺点是蛋白质很难重新溶解,而且样品中的非蛋白成分很难除去,可能会丢失膜蛋白和疏水性蛋白,导致2-DE图谱上
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