罗布泊来源胀果甘草根际枯草芽孢杆菌GA21次生-中国医药生物技术.pdf

14 中国医药生物技术 2012 年 2 月第 7 卷第 1 期 Chin Med Biotechnol, February 2012, Vol. 7, No. 1 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.005 ·论著 · 罗布泊来源胀果甘草根际枯草芽孢杆菌 GA21 次生代谢产物结构 与活性初步研究 靳婧，旭格拉 ·哈布丁，刘少伟，郭琳，蒋忠科，栾迎春，李展先，潘臻，孙承航 【摘要】 1 材料与方法 目的 分离鉴定枯草芽孢杆菌 GA21 发酵液中次生代谢产 1.1 材料 物并对其活性进行初步研究。 1.1.1 菌株 菌株 GA21 经 16S rRNA 测序及 方法 采用 TLC 、HPLC 等分离手段对次生代谢产物进行 NCBI 数据库 BLAST 比对表明 GA21 与菌株 分离；通过 HR-ESI 质谱、1D-NMR 和 2D-NMR 对其结 Bacillus Subtilis strain 47-B-41 核糖体碱基序列相 构进行鉴定；以琼脂平板法检测其次生代谢产物对金黄色葡 似性为 100% ，鉴定为枯草芽孢杆菌。 萄球菌、大肠杆菌、稻瘟菌、白色念珠菌的拮抗活性。 1.1.2 植物病原真菌 水稻稻瘟菌（Pyricularia 结果 分离得到两个异香豆素类次生代谢产物：GA21-20 oryzae ）由浙江省农业科学院夏湛恩研究员馈赠。 和 GA21-26 ；其中 GA21-20 的化学结构与 Amicoumacin 1.1.3 培养基 GA21 的斜面、种子和发酵培养 B 一致，但无抗细菌及真菌活性；GA21-26 有抗真菌活性， 基均为改良高氏一号培养基（可溶性淀粉 20 g ，氯 但无抗细菌活性，分子量为 435.20890 ，分子式为 化钠 50 g ，磷酸氢二钾 0.5 g ，硝酸钾 1 g ，硫酸 C H O N ，是一新的 3, 4- 二氢异香豆素类抗生素。 镁 1 g ，硫酸亚铁 0.02 g ，葡萄糖 1 g ，蛋白胨 0.5 g ， 21 29 7 3 GA21-26 在 2.5 μg/纸片对白色念珠菌即可显示抑制活性， 胰蛋白胨 0.3 g ，蒸馏水 1000 ml ，10% 无水碳酸 在 80 μg/纸片对水稻稻瘟菌显示抑制活性，表明 GA21-26 钠调 pH 8.0 ）。 在拮抗医学条件致病真菌方面有潜在用途。 水稻稻瘟菌培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养 基（PDA 培养基）由广东环凯生物科技有限公司 结论 枯草芽孢杆菌 GA21 能产生一系列 3, 4-二氢异香 提供。 豆素类抗生素，其次级代谢产物值得进一步研究。 白色念珠菌培养基 沙堡培养基（SDA 培养 【关键词】 芽孢杆菌，枯草； 异香豆素类； 核磁共 基）（麦芽糖 40 g ，蛋白胨 20 g ，琼脂 20 g ，蒸馏 振波谱学； 环境微生物学 水 1000 ml，调 pH 6.0 ）。 中国医药生物技术, 2012, 7(1):14-19 大肠杆菌培养基、金黄色葡萄球菌培养基均为 LB 培养基（酵母提取物 5 g ，蛋白胨 10 g ，NaCl 特殊生态环境，尤其是极端环