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脱落酸项目报告
概述
脱落酸(Abscisic acid,简称ABA)是以异成二烯为基本单位的倍半萜竣酸,化学名称为5-(1-羟基-2,6,6-三甲基-4-氧代-2-环己烯-1-基)-3-甲基-2-顺-4-反-戊二烯酸,英文化学名称为5-(lhydroxy-2,6,6-trlmethyl-4-oxo-2-cyclohexen-l-yl)-3-methyl-2-cis-4-trans-pentadienoic acid,分子式:C15H20O4,分子量:264.3。
脱落酸含有一个不对称碳原子(1位),可形成两种旋光异构体。植物体内的天然ABA具有右旋性,熔点 160~161℃,标志为(S)-ABA或(+)-ABA,CAS:[21293-29-8]。化学合成的ABA是一种外消旋混合物,含相等数量的(+)-ABA与(-)-ABA[或以(R)-ABA表示],熔点为190℃,CAS:[14375-45-2]。(+)-ABA和(-)-ABA的分子结构分别如图1和图2所示:
图1 (+)-ABA的分子结构示意图
图2 (-)-ABA的分子结构示意图
(+)-ABA和(-)-ABA两种异构体对涉及蛋白质合成的慢反应(30min)如抑制生长等具有类似活性,但对如气孔关闭等快反应(5min),仅(+)-ABA具生理活性,(-)-ABA则无活性。最近研究表明天然ABA与化学合成ABA(外消旋ABA)在生理作用上亦存在一定差别。(+)-ABA可完全抑制Pharbitis nil形成花芽,但(±)-ABA即使在高浓度下也不出现花芽完全抑制现象。换句话说,(+)-ABA兼有快速效应与缓慢效应,而(-)-ABA只有缓慢效应。目前,尚未发现在植物体内这两种异构体能互相转化。
天然脱落酸为白色结晶粉末,易溶于甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯与三氯甲烷等,难溶于醚、苯等,水溶解度3-5 g/L(20℃)。脱落酸的稳定性较好,常温下放置两年,有效成分含量基本不变,但应在干燥、阴凉、避光处密封保存。脱落酸水溶液对光敏感,属强光分解化合物。
天然脱落酸与生长素、乙烯、赤霉素、细胞分裂素并列为植物五大激素,它可以提高植物的抗旱和耐盐力,对开发利用中低产田以及植树造林、绿化沙漠等有极高的价值。ABA还是抑制种子萌发的有效抑制剂,因此可以用于种子贮藏,保证种子、果实的贮藏质量。此外,ABA还能引起叶片主孔的迅速关闭,可用于花的保鲜、调节花期、促进生根等,在花卉园艺上有较大的应用价值。对ABA及其应答基因的研究可揭示植物抗逆生理反应的分子过程,从而为定向增强作物对环境的适应力奠定基础。
脱落酸在农业生产上有广阔的应用前景,能产生巨大的经济效益和社会效益。因为存在于植物体内的天然脱落酸光学构型仅为(+)-cis, trans-ABA,传统的化学合成法生产成本极高,所以目前只有日本、美国等发达国家应用于大规模农业生产。
二、脱落酸的生产工艺与相关专利文献
2.1脱落酸的发现过程
自从发现生长素以后,人们用它解释植物的生长、顶端优势与向性运动,都可得到较满意的结果,但却难以解释休眠、器官衰老与脱落等生长受抑现象。
Hemberg 1949年发现橘树与马铃薯休眠芽提取液含有抑制生长素效应的因素。Bennet Clark和Kefford 1953年将多种植物的酒精提取液的酸性组分进行纸层析,再将各段层析物用燕麦芽鞘法进行鉴定,发现靠近原点的区域,存在着生长促进物质(a-促进剂),而于 Rf值 0.6~0.7区域内存在生长抑制物质,特称R-抑制剂。此外,Osborne 1955年从黄化的菜豆叶柄提取液中发现一种能促进菜豆外植体第一叶的叶枕形成离层的物质,称为“衰老因子”(SF)。
1961年Liu和Carn从吐絮的棉铃得到一种促进落叶的物质,称为脱落素I。遗憾的是,这种物质不仅活性弱,而且后来一直未能再次获得。1963年Ohkuma和Addicott等从棉花幼铃中分离出另一种促进落叶的物质,叫脱落素Ⅱ(abscisin Ⅱ),同年Eagles和 Wareing从槭叶片分离出一种抑制物质,能导致芽休眠,称为休眠素(dormin)。1965年,Wareing和Addicott等比较休眠素与脱落素Ⅱ的化学结构与性质,证明两者实质上是同一种物质,因此于1967年统一命名为脱落酸(abscisicacid,ABA)。后来逐渐认识到,ABA就是R-抑制剂和SF的最具活性的成分。
Ohkuma等1965年用紫外、红外、核磁共振与质谱对棉铃中的ABA进行了光谱分析,提出了 ABA平面结构(如图1所示)。
2.2脱落酸的生物合成
2.2.1 真菌的ABA合成途径
蔷斑色尾泡霉与豆类煤污尾抱霉(C.rosicola与
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