培养贴壁细胞（105~107 个）：胰酶消化完毕后,离心收集细.pdfVIP

组织细胞基因组DNA 提取试剂盒 Cat. No.: B0131 Size: 50 次 描述：该取试剂盒采用独特的裂解液，可快速可靠从组织和 操作方法 细胞样本中纯化出高纯度的基因组DNA。应用本试剂盒提取 （1）样本处理 （1.5 ml EP 管中处理） 5 7 的 DNA 可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、 培养贴壁细胞 （10 ~10 个）：胰酶消化完毕后，离心收集细 Southern 杂交等多种分子生物学实验。 胞沉淀，加入170 μl 水重悬细胞沉淀。通常获得1~10 μg 基因组DNA。 5 7 组分 （以下组分全部室温避光保存） 悬浮细胞 （10 ~10 个）：离心收集细胞沉淀，加入 170 μl 水重悬细胞沉淀。 名称 数量 全血分离的白膜层细胞：直接吸取白膜层细胞170 μl，不足 gDNA LB1 3 ml gDNA BB2 30 ml 情况下用水补足到 170 μl。通常获得 1~10 μg 基因组DNA。 Washing Buffer （已含乙醇） 55 ml 组织样品(1~10 mg)：用液氮研磨粉碎，加入到170 μl 水中， 蛋白酶K （20mg/ml ） 1ml 漩涡混合均匀。其它研磨粉碎法制备的样品，可直接取 170 RNase A(20 mg/ml) 0.5ml μl 匀浆物。通常获得5~40 μg 基因组DNA。 Nuclease Free H2O 10 ml 块状组织(1~10 mg)：挑取一块置于 1.5 ml EP 管中，加入 吸附柱 50 套 170 μl 水，可用剪刀尽可能剪碎或匀浆研磨。通常获得 2mL Nuclease Free 收集管 50 个 5~40μg 基因组DNA。 注意事项： （2 ）向上述准备好的样品溶液中加入50 μl gDNA LB1 和 （1）本试剂盒中的Washing Buffer 中已经加乙醇，无需单 10 μl RNase A 漩涡混合均匀，56℃水浴锅中消化5 min。 独添加。 （3 ）消化完毕后，向上述裂解中加入20 μl 蛋白酶漩涡混合 均匀，继续放置到56℃水浴锅中消化30min （细胞）、6h 或 （2 ）gDNA LB1 和gDNA BB2，储存时可能会有白色结晶 过夜（组织样品）。 沉淀，放置于56℃水浴锅溶解后，不影响使用效果。两个溶 液使用前请放置到56℃水浴锅进行预热。 （4 ）消化完毕后，13000rpm 离心15s，去