容量因子表达式.ppt

?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? * * 第二节 毛细管电色谱法 CEC是综合现代最新分离技术高效液相色谱和毛细管电泳的优势而发展起来的高效电分离微柱液相色谱技术。 该技术以电场力为驱动力，在毛细管中按其分配系数不同和自身电泳淌度的差异得以分离。 毛细管电色谱法分类 根据色谱柱不同 填充毛细管电色谱 开管柱毛细管电色谱 电色谱根据是否加压 非加压电色谱法 加压电色谱法 加液压的主要目的：为了防止气泡的产生 毛细管电色谱装置 毛细管电色谱仪基本结构 分离机制 电泳淌度与离子的电荷符号、数量、体积及背景电解质的性质有关。 分配系数取决于样品与固定相的分子间作用力。 由于CEC具有电泳与色谱的双重分离能力，因此理论上具有色谱法及电泳法更强的分离效能。 CEC的分离原理 基于电泳淌度与分配系数差别的双重功能。 容量因子表达式 式中kCEC为溶质在毛细管电色谱中的容量因子；k为单纯色谱因素引起的容量因子；μep是溶质的电泳淌度；μeo为流动相的电渗淌度。 理论板高度 式中u是流动相的线流速；Dm与Ds分别为溶质在流动相中的扩散系数；Cm与Cs分别是流动相和固定相的传质阻力系数；dc为毛细管内径；df为固定相厚度。 与CE及HPLC的比较 与CE相比CEC的优势： 既可与CE一样分离带电荷的物质，也可分离中性物质或两者的混合物。中性化合物在CEC中完全是通过它们的色谱性质差异而获得分离。 对于电泳淌度相近的物质，CE无法分离，而这些物质在CEC中的分配性质可能差异很大，就可利用CEC来分离CE无法分离的化合物。 与CE及HPLC的比较 与HPLC相比CEC的优势： HPLC的流型属抛物线状层流，在壁上的速度为零，中心速度为平均速度的数倍，导致色谱带的展宽和柱效降低，若提高柱效会导致极高柱压。 CEC柱不存在柱压降，可以使用1mm左右粒径大小的填料，进样量少，仅为几个纳升，溶剂耗费低，分析所需的平衡时间短； 应用 CEC主要用于： 芳香族化合物、染料、蛋白、肽、寡聚核苷酸、氨基酸和对映体等物质的分析检测。 对于疏水性强的样品、电泳淌度相近的离子化合物和对映体： CEC 显示出强大的分离能力，并在分析速度、重现性、检测限和定量方面达到了应用要求。 手性分离方式 手性固定相法，固定相上键合手性选择剂 1 非手性固定相结合手性添加剂流动相法 2 手性分子烙印固定相法，进行记忆性和专一性的手性分离。 3 复杂成分分析 CEC在对复杂成分特别是分子结构相近或电泳淌度接近的混合成分的分离是具有良好的应用前景。 例子 Taylor等利用梯度洗脱电色谱较好地分析了生物体液中皮质醇类化合物，在加电压的同时施加112MPa气压，实施加压电色谱并梯度洗脱，生物体液中肾上腺甾酮、氢化可的松、地塞米松、氟考龙等在较短时间内得以很好分离。 ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? * *