实验六-植物种子生命力的快速测定.ppt

实验六 植物种子生命力的快速测定 ;种子生活力：是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。没有生活力的种子是死亡的种子，不能萌发。 种子寿命：种子从发育成熟到丧失生活力所经历的时间。 种子寿命既与植物种类有关，也与贮藏条件（种子含水量、贮藏温度）有关。;种子活力检测评估方法： (1) 还原力（TTC法） ：呼吸→NADH → 还原TTC，胚呈红色。 (2) 原生质着色（红墨水法）：活种子不易着色，原生质膜具有选择透性。 (3) 呼吸释放CO2，pH下降，酸碱指示剂显色。 （BTB法） (4) 细胞中的荧光物质：紫外照射发蓝、蓝紫色荧光。 (5) 外观目测法：用肉眼观察玉米种胚形状和色泽。凡种胚凸出或皱缩、显黑暗无光泽的，则种子新鲜，生活力强，可作生产用种。;（6）浸种催芽法;1. 实验目的及意义 ;TTC法 红墨水法 BTB法 ;2.1 TTC法;TTC还原反应：;TTC法测定主要作物种子生活力要点 ;2.2 染料（红墨水）染色法 ;;2.3 BTB（溴麝香草酚蓝）法;;材料：小麦种子 仪器设备：小烧杯；刀片；镊子；温箱 试剂： 0.12％～0.5％TTC溶液（TTC可直接溶于水，溶于水后，呈中性，pH7±0.5，不宜久藏，应随用随配）。 0.02％～0.2％靛红溶液或5％红墨水（酸性大红G）。 1％BTB琼脂;4. 实验步骤;TTC法： 凡种胚全部或大部分被染成红色的即为具有生命力的种子； 种胚不被染色的为死种子。 红墨水法： 凡胚部不着色或表面略带浅红色者，即具有生活力的种子； 若胚部染成与胚乳相同的红色，则为死种子。 ;BTB法;TTC/红墨水法： 1）将种子用温水（约30℃）浸泡2~6h，使种子充分吸胀。 2）随机取小麦种子30粒，沿种胚中央准确切开，每切1粒确认各半种子皆 含胚后，分别放置两只培养皿中。 3）在上述一只培养皿中加入TTC溶液（至其中种子全部浸入为止），恒温箱（30~35℃）中保温至少30 min。另一培养皿中加入约5 ml红墨水，室温下浸5 min； 4）倒出红墨水后，用清水冲洗种子1~2次（注意要缓慢冲洗，不要让水流直接冲到种子上），观察种胚被染色的情况。从TTC溶液中取出种子，直接观察种胚颜色变化。 BTB法： 1）煮沸的1％BTB琼脂胶约20 ml，倒胶至培养皿（1/3皿），冷却。 2）取30粒完好的小麦种子，种胚向下略斜插入胶(不软不硬)。 3）将培养皿置于35 ℃下培养 1 h，对光观察，如果种胚附近呈现较深黄色晕圈是活种子，否则是死种子。 ;不同方法测定种子生活力记录表;6. 注意事项;1）染料浸泡时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 2）染色时间不能太长，否则不易区分。;7. 思考题