课件：免疫标记技术.ppt

【实验器材】 1、AFP诊断试剂盒 2、AFP阳性对照品，阴性对照品，待检品 3、微量加样器、温箱 【操作步骤】 将包被孔编号，分别加入阳性对照、待测样品及阴性对照各50ul 在各孔内加入酶结合物1滴，37℃温育30分钟 甩掉孔内液体，然后在各孔中分别加入洗涤液1滴，摇匀，弃去，用蒸馏水或自来水加满各孔甩掉，反复5次，然后在吸水纸上吸干（倒扣在吸水纸上） 各孔内加入底物和显色液各1滴，轻轻摇动混匀，室温避光反应2-5min，观察结果 【注意事项】 1、加样应加在加样孔的底部，避免产生气泡，防止产生假阴性 2、洗涤必须彻底，防止产生假阳性 【实验结果】 若待检孔显色浅于或等于阴性对照孔则判定为 若待检孔显色深于或等于阳性对照孔则判定为 若待检孔显色介于阴性对照孔和阳性对照孔之间则判定为 阴性 阳性 弱阳性 【临床意义】 1、原发性肝癌的大规模普查 2、可以用作检测胎儿畸形 、畸胎瘤 实验二免疫金标记技术 免疫金标记技术 免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 是将金颗粒标记抗原或抗体，用于检测相应抗体或抗原的一种实验方法 免疫金标记技术 该技术主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免疫检测