课件:免疫组化-1.ppt

  ㈡ 组织标本的取材   组织标本主要取之于活组织检查标本、手术切 除标本、动物模型标本以及尸体解剖标本等。前三 者均为新鲜组织,后者是机体死亡 2h以上的组织, 可能有不同程度的自溶, 其抗原可能有变性消失, 严重弥散现象,因此, 尸检组织应尽快固定处理, 以免影响免疫组化标记效果。   组织标本的取材常常受到多种因素的影 响,如各种内窺镜钳取的组织,常因过度挤 压而变形,严重者组织结构被破坏。大组织 标本病变分布广泛,抗原在组织中分布不均 一,出现人为的组织取材不准确。 为了避免上述缺点,组织取材时应注意:  ① 活检钳的刃口必须锋利,以免组织受挤压  ② 取材部位必须是主要病变区  ③ 必须取病灶与正常组织交界区  ④ 必要时取远距病灶区的正常组织作对照   为充分保存组织的抗原性,标本离体后 应立即作处理,或立即速冻成冰块进行冰冻 切片,或立即用固定液处理,进行脱水、浸 蜡、包埋、石蜡切片。如不能迅速制片,可 贮存于液氮罐内或-70℃冰箱内备用。   二、细胞和组织的固定   ㈠ 固定   为了更好的保持细胞和组织原有的形态 结构,防止组织自溶,有必要对细胞和组织 进行固定。固定的作用不仅是使细胞内蛋白 质凝固,终止或抑制外源性和内源性酶活性, 更重要的是最大限度的保存细胞和组织的抗 原性,使水溶性抗原转变为非水溶性抗原, 防止抗原弥散。   不同抗原,其稳定性也不相同,

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