课件:免疫组化基本技术.ppt

1.苏木素衬染色剂 (1)Mayer氏苏木素:取1g Mayer氏苏木素加温溶于100ml蒸馏水中,再加入50g碘酸钠和50g钾明矾,溶解后加入枸橼酸和水合氯醛,溶解后过滤。 (2)Harris氏苏木素:取2.5g Harris氏苏木素溶于25ml无水乙醇中,另将钾明矾加温溶于500ml蒸馏水中,待钾明矾全部溶解,再将二液混合在一起,加入氧化汞,溶解30min,冷却后过滤,使用时加醋酸4ml,可增加染色强度。 2.甲基绿:取2%甲基绿水溶液20ml倾入洁净的分液漏斗,加入三氯甲烷充分摇荡混合,使甲基绿中的甲基紫溶于氯仿中而呈紫红色。旋动分液漏斗下部的砂塞,移去紫红色的三氯甲烷,如此反复更换氯仿,直到氯仿为无色。 3.核固红:取0.1g核固红溶于100ml 15%硫酸铝水溶液,加热溶解,冷却后过滤。 九、IHC常用缓冲液: 1.0.01M pH7.4 PBS 2.0.02M pH7.6 TBS THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 ①热处理后应注意自然冷却; ②热处理液不要让其煮干; ③不要任何抗原的检测都使用该方法; ④一批抗原的检测其温度和时间一定保 持一致; ⑤形态学结构的改变:一般经高温修复后胞浆无明显的破坏,而对细胞核内影响较大,会出现核破裂,苏木素淡染等现象。 ⑥如果在常用的修复液无法得到阳性结果,或经修复后抗原定位发生改

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