课件：免疫组化的基本原理修改版.pptVIP

二、间接法 原理：HRP标记在第二抗体上， 抗原---特异性抗体---第 二抗体● HRP复合物 步骤：二步法 第二抗体 组织抗原 第一抗体 过氧化物酶 间接法原理示意图 抗原 一抗 酶标二抗 特点：敏感性较直接法高，一 种标记抗体能用于相应 动物制备的多种特异性 抗体，检测多种抗原。 但较直接法费时，非特 异染色稍重。 酶标抗体技术也还存在一些问题，最主要的是酶与抗体连接可损害二者的活性。20 世纪70年代初，发展了非标记抗体酶法，包括酶桥法 ，PAP法。 三、酶桥法 酶桥法的基本原理是，首先用酶免疫动物，制备效价高，特异性强的抗酶抗体，然后利用第二抗体做桥，将抗酶抗体连接到与组织抗原结合的第一抗体上。再将酶结合在抗酶抗体上，经显色显示抗原的分布。 酶桥法 组织抗原 第一抗体 第二抗体 第三抗体（抗酶抗体） HRP 抗原 一抗 二抗 抗酶抗体 酶 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 特点 优点：提高了敏感性 缺点：游离的酶难以精确的稀释到所需浓度。非特异性结合的酶也难以洗去，背景色重。 四、PAP法 PAP为(peroxidase