课件：免疫学诊断.ppt

* * 七、免疫印迹(Western blotting) * * 八、AlphaScreen分析技术 在均相条件下，将带有感光材料的感光微球(纳米级)以及带有发光化合物的发光微球(纳米级)作为试剂和检测样品混合。由于在感光微球与发光微球表面带有生物活性分子(抗体或抗原)并能迅速捕捉被检测样品中的靶分子。感光微球、靶分子和发光微球三者共同形成免疫夹心复合物。 　　激发光照射后，感光微球被诱导激活，并释放高能态的活性氧离子。该高能态的活性氧离子在近距离被发光微球俘获，从而传递能量以激活发光微球中的发光化合物并最终激发三价铕原子发出时间分辨荧光。而当样本不含靶分子时，无法形成免疫夹心复合物，虽然在光激下活性氧离子从感光微球中释放, 无法到达发光微球,即在液相中迅速淬灭从而无时间分辨荧光产生。  * Emission 610 nm 发光珠 1O2 A B Excitation 680 nm 感光珠 200nm Excitation 680 nm 感光珠 1O2 A 发光珠 C AlphaScreen分析技术 * 操作流程 1. 20μl发光微珠 2. 20μl标准或样品 3. 20μl 生物素化抗体 4. 175μl 感光微粒 ? 37℃孵育30分钟直接检测 发射光 610 nm 发光珠 1O2 A B 激发光 680 nm 感光珠 200