课件：免疫组化原理.pptVIP

THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 免疫过氧化酶染色的多种方法中，其主要的不同点在于显色系统的差异： 间接酶标法：利用标记于桥联抗体的酶 PAP法： 利用PAP复合物 ABC法： 利用AB复合物 LSAB法: 利用直接标记于亲和素的酶 EPOS一步法及EnVision二步法：多聚物载体 其目的都是设法提高免疫组化染色的敏感性 显示系统 三 免疫组化的基本流程 免疫组化原理及流程介绍 1.脱蜡与水化 2. 封闭内源性过氧化物酶 3.抗原修复、暴露抗原决定簇 4.封闭非特异性蛋白 5.一抗孵育 6.二抗孵育 7.SP 反应 8.显色 9.复染、脱水、透明、封片 2. 封闭内源性过氧化物酶 免疫组化原理及流程介绍 1.脱蜡与水化 脱蜡与水化的目的是确保抗体等其它试剂能够充分与组织中抗原等结合发生反应。若脱蜡和水化不全易出现局灶性反应和浸洗不全，而产生非特异性背景着色。 免疫组化原理及流程介绍 2. 封闭内源性过氧化酶 其主要目的是降低内源性过氧化物酶的活性。在传统的ABC法和SP法中，免疫组化反应结果容易受到内源性过氧化物酶的干扰，必须用过氧化氢等进行灭活。 免疫组化原理及流程介绍 3. 抗原修复 暴露抗原决定簇 由于组织中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定过程中，发生了蛋白之间交联及