课件：免疫组化基本原理.pptVIP

● 制备抗酶抗体 ● 制备PAP复合物 酶桥法 组织抗原 第一抗体 第二抗体 第三抗体（抗酶抗体） HRP 二、酶桥法 原理：HRP标记在抗酶抗体（三抗）上， 抗原---特异性抗体---第 二抗体---第三抗体● HRP复合物 一抗、三抗有何关系？ THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 优点：与酶标记抗体法相比，敏感性高 （酶与三抗通过抗原-抗体反应 结合，避免直接标记引起两者活性降低） 缺点： 较费时 步骤：四步法 一、PAP法 原理：抗原---特异性抗体---第 二抗体（桥抗体）--- PAP复合物 组织抗原 第一抗原 第二抗体 PAP复合物 HRP 三、PAP法（过氧化物酶抗过氧化物酶复合物法） 原理：与酶桥法相似，不同之处是将酶与三抗制备成PAP复合物。 抗原---特异性抗体---第二抗体（桥抗）---PAP复合物 优点：敏感性较高 背景染色较轻 局限：特异性抗体与PAP必须为同一种属动物 步骤：三步法 APAAP法（碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶复合物法） 原理：抗原---特异抗体---二抗--- APAAP复合物 优点：非特异背景较轻，不受内 源性酶的干扰