课件：免疫组化知识普及二抗免疫组化试剂盒.pptVIP

可编辑 可编辑 免疫组化知识普及、二抗免疫组化试剂盒 优宁维缪娓 直接法 直接法是将酶（如HRP）标记在特异性一抗上，然后用酶标记抗体直接与相应抗原特异性结合，形成抗原-抗体-HRP复合物，最后用酶底物显色。 优点：简单、步骤少、省时、特异性高。 缺点：敏感性差 间接法 我这边的讲的间接法就是酶标记在二抗上，再与一抗反应，然后进行显色反应。 优点:较直接法敏感性增强 旁边的图很形象的对比出了间接法的优点。如抗原上每个分子结合3-5个分子抗体，当此抗体作为抗原时又可结合3-5个分子的酶标二抗，所以最后显色的时候敏感性更高 亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法ABC法 亲和素（avidin）和小分子生物素具有极高的亲和力，每个亲和素具有4个生物素结合位点。 ABC法试剂盒里一般包含的有，生物素标记的二抗、亲和素、生物素标记的HRP等。 ABC复合物就是生物素标记的HRP与过量的亲和素反应制备。 ABC法示意图 亲和素分子有四个生物素结合部位，可以多价形式同时结合生物素化的大分子衍生物和酶标记物，使得更多的HRP聚合在一起后底物显色，敏感性高、信号强 跟ABC法差不多的就是S-P法或者叫LSAB法或SABC法。 试剂盒里一般包含有生物素标记的二抗、链霉亲和素/HRP的结合物等等。 链霉亲和素（streptavidin）和亲和素一样，也有四个生物素结合位点，亲和力更高