课件：免疫组织化学检测技术.pptVIP

4、设立对照实验 为确定结果的可靠性，在实验中必须设置对照。通常是针对第一抗体设立对照，包括阳性对照、阴性对照、替代对照、空白对照、自身对照和吸收试验等。 （1）阳性对照 用已知抗原阳性的切片与待测标本同时进行免疫细胞化学染色，阳性对照应呈阳性结果，即为阳性对照。 （2）阴性对照 用不含已知抗原的标本作对照，实验结果为阴性，即为阴性对照。阴性对照中还包括空白对照、替代对照、吸收和抑制对照等，用以排除假阳性结果。 三、免疫组化的全过程 5、观察 直接在显微镜下观察结果（免疫荧光直接法），或待标本显色后再用显微镜观察结果（免疫酶直接法）。 三、免疫组化的全过程 三、免疫组化的全过程 6、免疫组化的结果判断 免疫组织化学的结果判断应非常严谨，阳性细胞的染色分布有三种类型：胞浆型、细胞核型和细胞膜表面型。阳性细胞显色深浅可反映出抗原的浓度，并以此作为定性、定量和定位的依据。 阳性细胞的染色常定位于细胞，并于阴性细胞间有明显间隔，而非特异性染色常不限于单个细胞，而是累及一片细胞，两者可由显著区别。 三、免疫组化的全过程 染色 特异性染色 非特异性染色 显色部位 特定细胞或间质 细胞和间质均匀染色或更强 显色定位 特定，具有结构性 无特定部位，无结构性 显色程度 同一部位呈不同程度显色 无分布规律，某一片均匀着色 荧光免