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第十四章病毒学总论; 病毒(virus)的发现
1892年发现第一个病毒即烟草花叶病毒
1898年发现动物口蹄疫病毒
首先被证实对人类有致病性的是黄热病毒(1901年发现);病毒的特点:
1、体积微小,必须用电子显微镜观察;
2、只有一种遗传物质;
3、必须在活细胞内显示生命活性;
4、无完整的细胞结构。;病毒学:
即研究病毒的本质、病毒与宿主相互作用和规律的生物学科。;1、临床约70-80%传染病是由病毒引起的;
2、病毒性疾病对人类健康危害极大;
3、近20年来,新病毒不断被发现,由此引发的病毒性疾病正越来越多的被人们所关注.;第一节 病毒的形态结构与分类;1、测量单位——纳米(nm) 3、观察工具——电子显微镜
2、大多数病毒的直径小于150 nm;病毒的形态:
多为球型,还有杆状、子弹状、砖块状及蝌蚪状等。;乙肝病毒;轮状病毒;子弹状的狂犬病毒;噬菌体;天花病毒;衣壳(capsid):由许多蛋白质壳粒组成,保护核酸,介导病毒感染细胞且有抗原性。; 包膜(envelope):包绕在核衣壳外,上常有刺突(spike),是病毒的表面抗原。;;EBV结构模式图;1、病毒核酸;2、病毒衣壳:由多肽构成的壳微粒组成,;病毒的几种对称类型(据壳粒排列方式所分)
;;;3、病毒包膜;4、病毒的蛋白质;非结构蛋白:可存在于病毒体内也可仅存在于宿主细胞内。
(1)病毒内所有的重要的酶类;
(2)抑制宿主细胞生物合成或抑制病毒抗原经MHC递呈的蛋白;
(3)转化宿主细胞的作用;
(4)抗细胞因子或抗细胞凋亡作用。;三、病毒的分类;1、DNA病毒类;
2、RNA病毒类;
3、DNA和RNA逆转录病毒类。;
;第二节 病毒的增殖
遗传与变异;一、病毒的培养:;(二)鸡胚培养;卵黄囊接种;(三)组织培养(最常用细胞培养); 2、细胞种类:
(1)原代细胞:
以无菌手续采动物等的组织切碎洗净后用胰蛋
白酶消化得分散的单个细胞,加培养液在细胞瓶内
培养所获得的单层贴壁细胞为原代细胞;
原代细胞消化、重新分装并培养所得细胞为次
代细胞。
特点:对病毒易感性高,主要作为自标本中分
离的工具。; (3)二倍体细胞:
在体外分裂50-100代后仍保持其二倍染色体数目的单型细胞,常用人胚肺二倍体成纤维细胞。; 3、病毒在细胞内增殖的检查与鉴定; (2)病毒的定量测定:
TCID50(50%tissue culture infective dose):
将病毒进行系列稀释后行细胞培养,观察能使半数细胞培养孔或试管内的细胞发生细胞病变(CPE)时的病毒量,即TCID50。;;(一)病毒的增殖过程;(一)吸附和穿入(absorption and penetration)
吸附:病毒的表面配体位点与细胞表面特异性受体结合;
穿入:病毒进入宿主细胞。;吸附;(二)脱壳(uncoating):
病毒核酸游离于宿主细胞内。;(三)生物合成(biosynthesis):; 根据基因组转录mRNA及转译蛋白质的不同,生物合成可分六大类:;1、DNA病毒(双链):
细胞核内合成DNA,细胞质内合成病毒蛋白。;晚期:;2、RNA病毒(单链):
多数在细胞质内合成子代RNA及病毒蛋白。;(2)负单链RNA病毒(有依赖RNA的RNA多聚酶):;(3)逆转录病毒(有逆转录酶,即依赖RNA的DNA多聚酶):;(四)装配与释放(assembly and release); 裂解细胞后病毒释放出来;出芽释放;出芽释放;;;三、病毒增殖的细胞效应:; 2、产生原因:
(1)第一种病毒感染细胞后使细胞表面受体或代谢途径发生变化;
(2)病毒感染细胞后可诱导细胞产生抑制病毒复制的一组蛋白(干扰素,interferon,IFN) ;四、病毒的异常增殖; 2、顿挫感染(abortive infection)
病毒进入宿主细胞后,由于细胞缺乏病毒复制所需的酶或能量等必要条件,使病毒在其中不能合成自身成分,或虽合成病毒核酸及蛋白质,却不能组装成完整的病毒体,是为顿挫感染。;五、理化因素对病毒的影响
一、物理因素 温度、PH、射线和紫外线
二、化学因素 脂溶剂、氧化剂、卤素、醇类;六 病毒的遗传变异;(一)突变株:
病毒基因改变而发生病毒生物学性状改变,该毒株若能稳定传代即为变异株(variant).
;(
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