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药物对离体豚鼠回肠的作用
Effects of Drugs on isolating guinea pig ileum
观察胆碱能神经递质acetylcholine (Ach、乙酰胆碱),炎症介质histamine (His、组胺)对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。
观察M胆碱受体拮抗剂atropine(阿托品)和组胺H1受体拮抗剂chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏)对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。
实验目的
乙酰胆碱:小剂量时有M胆碱受体激动作用。Ach与M-受体结合,使平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流↑,肌浆[Ca2+]↑,平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有.N胆碱受体激动作用,使胃肠道平滑肌兴奋。
阿托品:为M胆碱受体拮抗剂。阿托品与平滑肌细胞膜M-受体结合,阻断乙酰胆碱与M-受体结合,从而阻断乙酰胆碱对M-受体的激动作用。
实验原理
3. 组胺:组胺是一种血管活性胺。与平滑肌细胞膜H1受体结合,通过激活G蛋白-磷酸脂酶C系统,使细胞内Ca2+增高,平滑肌收缩。
4. 氯苯那敏(扑尔敏):为组胺H1受体拮抗剂。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合,从而阻断组胺对H1受体的激动作用。
实验原理
1. 材料
1.1 实验动物
Dunkin-Hartley 豚鼠(guinea pig)
1. 材料
1.2 药品与试剂
10-2g/L氯化乙酰胆碱(acetylcholine chloride)溶液;
10-2g/L磷酸组织胺(histamine phosphate)溶液;
拮抗剂:1g/L硫酸阿托品(atropine sulfate)溶液;
10-3g/L氯苯那敏(chlorpheniramine)溶液。
台氏液(Tyrode) g/L: NaCl 8.0, KCl 0.2, MgCl2 0.1, CaCl2 0.2,
NaH2PO4 0.05, NaHCO3 1.0, 葡萄糖 1.0。
1.3 仪器:
离体装置:
双层玻璃浴槽(20ml)、张力换能器 、微距调节夹
恒温水浴箱、多道生理信号采集处理系统
RM6240生物信号采集处理系统
1. 材料
2.1 准备
清洗浴槽:清洗后,将台氏液装至刻度;
检查温度:37℃±0.5 ℃;
检查通氧: 单个小泡溢出;
打开电脑:选中桌面RM6240图标
选择“实验”---生理科学实验---肠肌
2. 方法
清醒豚鼠
轻击头部后股动脉放血
打开腹腔
取出回肠
制作回肠标本
一端固定在通气钩上
置含有37℃台氏液的浴槽中
通氧
另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接
连接RM6240生物信号采集处理系统
选择“实验”---生理科学实验---肠肌
归零
调节换能器张力(1g)
稳定20分钟
2. 方法
2.2 实验步骤:
找到回盲部,在离回盲部1cm处剪断回肠,取出回肠约15cm左右一段,置于盛有台氏液的培养皿中,将回肠剪成1-1.5cm的小段。
2.3 制作回肠标本:
1-1.5cm
线长50cm左右
2. 方法
回肠标本
放入麦氏浴槽中
将回肠标本的上端连线打一活结,勾在张力换能器的悬臂梁钩上
将回肠标本的下端连线系于标本固定钩上,
选中桌面RM6240图标
选择“实验”--生理科学实验--肠肌
工具--快速归零(按右上快速归零Z)---调 “ 0”
旋转调节螺母,调张力至1g。(见左上显示平均1g左右)
调节螺母
将RM6240系统处在记录状态;
2.4 回肠标本张力调节
2. 方法
2. 方法
1.实验---生理科学实验--- 肠肌
2.记录、实验中用暂停, 实验结束用停止,停止后一定要另存为d或e盘。
3.标记:在标记窗内打上药名,加药时做好标记。
4.测量方法:选测量方法选择键---峰峰值测量
5.剪辑:按剪辑图标---选中---剪切
6.导出:文件---当前屏图像输出---到word
标记窗
2.5 RM6240系统的使用:
停止
暂停
① 待离体回肠稳定10min,记录一段正常收缩曲线。
②加Ach0.3ml,观察并记录其收缩曲线(如无收缩反应的话,换液, 稳定5min后加Ach), 加入拮抗剂阿托品0.3ml, 曲线稳定后
加Ach,记录一段曲线后,用台氏液连续冲洗浴槽3次换液,
稳定5min。
③加Histamine0.3ml,观察并记录其收
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