农杆菌介导的基因敲除技术在丝状真菌基因功能研究中的应用_李彩红.pdfVIP

棉 花 学 报 ， （ ）： Cotton Science 2013 25 3 262~268 农杆菌介导的基因敲除技术在丝状真菌基因功能研 究中的应用 李彩红，李志芳，冯自力，赵丽红，师勇强，王玲飞，刘义杰，朱荷琴* （棉花生物学国家重点实验室 中国农业科学院棉花研究所，河南安阳 ） / 455000 摘要：近年来不少丝状真菌全基因组测序已经完成或正在进行，基因功能研究已成为真菌研究的一个热点。 利 用反向遗传学的方法敲除基因是研究丝状真菌功能基因的常用方法之一， 基因敲除是通过外源DNA 与染色 体DNA 之间的同源重组，可以敲除整个基因，或者将一个基因替换成该基因的等位基因，或者用一个调控启 动子替换一个基因正常的启动子，从而精细地定点修饰和改造基因DNA 片段的技术。 本文简述了利用农杆菌 介导的遗传转化方法（ATMT ）进行基因敲除的技术在丝状真菌基因组功能研究中的应用。 关键词：农杆菌介导的遗传转化；基因敲除；同源重组；丝状真菌；功能研究 中图分类号： 文献标志码： S435.621 A 文章编号：1002-7807(2013)03-0262-07 Applications of Gene Knockout by ATMT in Filamentous Fungus Functional Genomics LI Cai-hong, LI Zhi-fang, FENG Zi-li, ZHAO Li-hong ,SHI Yong-qiang , WANG Ling-fei, LIU Yi-jie, ZHU He-qin* (State Key Laboratory of Cotton Biology / Institute of Cotton Research, Chinese Academy of Agriculture Sciences, Anyang, Henan 455000, China) Abstract: With many fungal genomes having been or currently being sequenced, identification of gene function has become a hot topic in fungal research. Gene knockout is one of several techniques used in studies of gene function. The method can be used to delete entire genes, replace an allele with another, exchange a given genes normal promoter for a regulatable one, and label genes with epitope tags or fluorescent proteins. In this paper, we review applications of gene knockout via Agrobacterium tume- faciens-mediated transformation (ATMT) in filamentous fungus functional genomics. Key words: ATMT; gene knockout; homologous recombination (HR); filamentous fungus; functional identification 丝状真菌占真菌界中很