生物化学讲义18－蛋白质的合成及转运.ppt

第十八节 蛋白质的合成及转运 第十八节 蛋白质的合成及转运 §18.1 蛋白质合成的分子基础 §18.2 蛋白质翻译的步骤 §18.3 蛋白质的运输及翻译后修饰 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 蛋白质合成的分子基础： mRNA是蛋白质合成的模板 原核生物mRNA翻译时，核糖体与mRNA上游的SD序列结合，开始翻译； 而真核生物中是由mRNA与5’端帽子结构来完成的。 tRNA转运活化的氨基酸至mRNA模板上 tRNA含有两个关键的部位:一个是氨基酸结合部位，另一个是与mRNA的结合部位。 核糖体是蛋白质合成的工厂 核糖体的结构： 核糖体是rRNA和核糖体蛋白组成的一个巨大的复合体。不同类型生物中核糖体的结构高度保守，尽管其rRNA和核糖体蛋白的一级结构有所不同，但其三级结构却惊人的相似。 核糖体的大亚基上有两个重要的位点：P位点是结合肽酰tRNA的肽酰基的位点，A位点是结合氨酰tRNA的氨酰基的位点。 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 细菌核糖体： 50S＋30S 真核生物： 60S＋40S 第十八节 蛋白质的合成及转运 §18.1 蛋白质合成的分子基础 §18.2 蛋白质翻译的步骤 §18.3 蛋白质的运输及翻译后修饰 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 原核生物的翻译起始： tRNA装载 在氨酰tRNA合成酶的作用下，使氨基酸连接到tRNA 3’端的腺苷酸上，形成氨酰tRNA。 tRNA识别 氨酰tRNA合成酶的专一性很高，共有20种，每一种只用于单一种氨基酸与相应tRNA的结合。 tRNA上的某些结构特征能使它在氨酰tRNA合成酶的催化下，与特定的氨基酸结合；这些结构特征就是“第二遗传密码”。“第二遗传密码”常在tRNA的受体茎上，但在其他区域的也有不少。 氨酰tRNA合成酶催化氨酰-tRNA的组装 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 原核生物的翻译起始： 核糖体解离 翻译起始复合物首先是在核糖体小亚基上组装起来。 每一次翻译后，核糖体的大小亚基必须解离，以让新的翻译起始复合物形成 核糖体解离需要起始因子（IF）的协助 IF-1促进核糖体大小亚基的解离；IF-3则通过与小亚基结合，阻止其与大亚基重新结合 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 原核生物的翻译起始： 起始tRNA 携带甲酰甲硫氨酸的tRNA（tRNA ），识别密码子AUG、GUG和UUG。 tRNA 与携带甲硫氨酸到蛋白质链内部的tRNA（tRNA ）稍有不同，后者只识别AUG。 mRNA与核糖体小亚基的结合 在起始密码子的上游（数个核苷酸），有一共同序列AGGAGGU，与16S rRNA 3’端的序列（3’ HO-AUUCCUCCAC 5’）互补配对，是核糖体的结合位点；这一序列又称SD序列。 Met f Met f Met m 第三部分 分子生物学－信息途径 原核生物的翻译起始： 甲酰甲硫氨酰tRNA与30S起始复合物的结合 主要由IF-2负责，IF-1和IF-3辅助，此外还需要GTP（GTP的作用是使IF-2能顺利地结合到核糖体小亚基上）。 70S起始复合物的形成 30S起始复合物加上核糖体大亚基（50S），就形成70S起始复合物 在这一过程中，IF-1和IF-3先从复合物中解离，接着IF-2解离，同时GTP水解成GDP和磷酸（促进IF-2解离） IF-2的解离是形成具活性的70S复合物所必需的 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 真核生物的翻译起始： 与原核生物的翻译起始的差异 起始氨基酸不是甲酰甲硫氨酸，而是甲硫氨酸；起始tRNA则为tRNA 。 真核mRNA不含SD序列，但有5’帽子，有助于起始复合体的形成。 通过扫描寻找起始密码子。 Met i 扫描找到起始密码子后，再加上核糖体大亚基，就可开始翻译。 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 真核生物的翻译起始： mRNA二级结构与翻译起始的关系 mRNA 5’端附近的二级结构对翻译起始既可有正效应，也可有负效应。 紧接AUG后（AUG后12 ~ 15 nt）的发夹结构能使核糖体停顿，因而使该AUG更有可能成为起始位点。 起始因子（eIF） 要比原核生物的复杂，但也有相应的因子。 主要的起始因子有6种（类） eIF1、 eIF2、 eIF3、 eIF4、 eIF5、 eIF6 第三部分 分子生物学－信息途径 真核生物的翻译起始 第三部分 分子生物学－信息途径 翻译起始的控制： 原核生物的起始控制 mRNA二级结构