从空间搭载维生素C生产菌株中筛选高产菌株.PDF

第24卷第3期 河北大学学报(自然科学版) V01．24N。．3 2004 ofHebei ScienceEdition) May 。2004年5月 Journal University(Natural 从空间搭载维生素C生产菌株中筛选高产菌株 郭立格1，刘其友1，杨润蕾1，吕志堂1，张利平¨，吴前进2，方晓梅2，蒋兴村2 (1．河北大学生命科学学院，河北保定071002；2．东方红宇航技术有限公司，北京100086) 摘 要：对国内外首次经过“神舟四号”宇宙飞船搭载的维生素C生产菌株进行了初筛和复筛，得到了 产2一酮基一L一古龙酸(2一KLG)的高效菌株，提高了其发酵效率．经研究发现，航天搭载使大茵发生负突 变，而所筛选的418株小菌中，共筛出4株高产菌株，转化率提高了3．9％～5．2％，并发现部分菌株发酵周 期有不同程度的缩短． 关键词：维生素C；2一酮基一L一古龙酸；空间搭载；高产菌株 中图分类号：Q815 文献标识码：A 文章编号：1000一1565(2004)03—0284—04 维生素c(即L一抗坏血酸，简称Vc)作为人体必需的营养物质，生理作用十分广泛uJ．在世界范围内， Vc用作饲料添加剂、食品添加剂、食品营养强化剂等仅数年的时间，但发展趋势却十分迅猛；在国外Vc被 广泛地应用于饲料工业中，这大大提高了畜禽养殖业和水产养殖业的经济效益；Vc在医药方面也有重要用 途拉J．尹光琳等首创的“二步发酵法”是Vc产业史上的里程碑．目前，探索Vc生产方法的微生物合成新途径 的研究主要集中在：构建基因工程菌；从D一葡萄糖一步发酵产生2一KLG；对L一山梨糖代谢工程研究和 未应用于生产． 在目前这种国际市场激烈竞争的状况下，要进一步提高现有Vc生产企业的经济效益，降低生产成本是 唯一的有效途径．因此提高、t的产量和转化率显得及其重要． 空间生物学是空间科学和生命科学的交叉领域，在本世纪后期蓬勃兴起并得到迅速发展L4-5j．空间飞 行或航天搭载环境对于长期处于地球重力之下生活的生物，可以说是一种逆境，它造成了许多生理代谢途径 的改变，继而引起生物生长发育的变化，其中具体的机理却不完全清楚．但按照现有理论，地球生物从起源、 进化、演替经30多亿年至今，一直处于1 g重力的作用下，在代谢、生长、发育和应激反应中，重力都起着重 要的作用[6呻]．本实验的菌株经过了“神州四号”飞船搭载处理，从中进行了初筛和复筛，并筛选出高产、高 效菌株． 1材料和方法 1．1材料 ． 1．1．1菌种氧化葡萄糖酸杆菌(QMc朔。沈c￡erD’删如咒s)(俗称“小菌”)；苏云金芽孢杆菌(＆c删比s优只韶一 招一“m)(俗称“大菌”)；航天搭载处理后的大、小菌． 1．1．2培养基 收稿日期：2003—11—01 作者简介：郭立格(1972一)，女，河北威县人，河北大学讲师，主要从事微生物技术研究 *通讯联系人 万方数据 第3期 郭立格等：从空间搭载维生素c生产菌株中筛选高产菌株 ‘285。 == 膏3；pH值6．7． 7；玉米浆7；pH值6．7． 1．2方法 1．2．1 d．成 航天搭载对大菌影响的实验方法 分离菌种：稀释涂布，挑取单菌落于固体斜面，30℃培养1 熟斜面的制备：与出发小菌搭配继续培养2d．摇瓶发酵：以出发菌株为对照，从成熟斜面上接一环混菌于装 有9mL发酵培养基的50mL发酵管中，28℃振荡培养72h左右(210r／min)．测定发酵液中2一KLG的酸 量(以下简称酸量)，并计算转化率． 1．2．2航天搭载对小菌影响的实验方法分离菌种：稀