生化检测样本处理方法-Elabscience.PDFVIP

® Elabscience 生化检测常见样本的收集及处理方法 （方法仅供参考） 一、液体样本的处理 1.血清样本 取新鲜血液，在 25℃条件下静置 30 min 使血液凝结。4℃，2000 ×g 离心 15 min，取上层淡黄色澄清液体即为血清。血清置于冰上待测，若 不能当天检测，于 -80℃保存，可储存一个月。 2.血浆及红细胞样本 取新鲜血液加入含有抗凝剂的试管中，颠倒混匀，4℃，700-1000 ×g 离心 10 min，取上层淡黄色透明液体即为血浆，不能吸取中间白色干扰层（白 细胞和血小板）。将血浆置于冰上待测，若不能当天检测，于 -80℃保存，可储存一个月。 将中间白色干扰层舍去，将下层红细胞沉淀，用 4 倍体积 2-8℃的超纯水裂解，于 4℃，10000×g 离心 15 min，上清液即为红细胞溶解物。 3. 全血样本 取新鲜血液加入到盛有抗凝剂的管中，轻轻颠倒混匀，置于冰上待测。若不能当天检测测，4℃保存2天。 4.尿液样本 收集新鲜尿液，4℃，10000×g 离心 15 min，取上清于冰上待测。若不能当天测，放入-80℃保存，可储存一个月。 5.胸水样本 收集新鲜胸水，加入含有抗凝剂的试管中，4℃，1500×g 离心 10 min，取上清于冰上待测，若不能当天测，保存在-80℃中，可储存一个月。 6. 脑脊液样本 将收集的脑脊液，4℃，1500×g 离心 10 min，取上清于冰上待测，若不能当天测，保存在-80℃中，可储存一个月。 7. 脑脊液样本 ① 高速离心法： 于 4℃，10000×g 离心 15 min 后，用棉签吸弃上层乳白色液体，吸取中层澄清血清于冰上待测。 ② 乙醚萃取法： 取血清与乙醚 1:1 混合，涡旋混匀仪震荡 30 秒，室温静置 5 分钟，4℃，1500×g 离心5 min，枪头穿过乙醚层，取下层清亮血清进行测量。[1] ③ 生理盐水稀释法： 将血清与生理盐水按照 1:4 （具体稀释倍数按照指标确定）稀释后混匀待测（适用于轻度高脂样本）。 ④ 沉淀分离法： 将血清用联合沉淀剂磷钨酸 - 镁沉淀剂或者聚乙二醇 - 硫酸葡聚糖沉淀剂沉淀 [2]，4℃，1500×g 离心 10 min 后，取上清待测。（具体沉 淀剂的种类及浓度需要按指标确定）。 二、细胞、组织及菌类等需匀浆处理的样本的处理 细胞样本 悬浮细胞： 6 4℃，1000-2000×g 离心 10 min 收集细胞，按照 10 个细胞加入 300-500 μL 匀浆介质的比例加入匀浆介质，进行机械匀浆，充分破碎（无 明显的细胞沉淀，可在显微镜下观察），4℃，10000×g 离心 10 min，取上清置于冰上待测，若不能当天检测，于-80℃保存，可保存一个月。 贴壁细胞： 吸弃培养液，用PBS （0.01 M，pH 7.4）将细胞洗一遍。用细胞刮刮下细胞（不能用胰酶和EDTA 处理），加入2-5 mL PBS （0.01 M，pH 7.4）， 收集细胞悬液，后处理方法见悬液细胞处理方法。 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道858号生物医药 1 techsupport@elabscience.cn 园二期B18栋 ® Elabscience 10%组织匀浆 取 0.020-1.0 g 新鲜组织块，用 2-8℃的 PBS （0.01 M，pH 7.4）漂洗，去除血液，滤纸吸干，称重，放入匀浆容器中，按照重量（g）：体积 （mL