《实验诊断学》第九章 临床常见病原体检测.ppt

主 要 内 容 第一节 标本的采集运送、实验室 评价和检查方法 第二节 病原体耐药性检测 第三节 临床感染常见病原体检测 第五节 性传播疾病病原体检测 第六节 医院感染常见病原体检测 感染性疾病的现状 感染性疾病的病原体：细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次体 以及寄生虫等。 自从抗生素的发现和预防接种的实施，许多曾严重危害人体健康的病原体已消灭或基本消灭 新的传染病陆续被发现，曾绝迹的老传染病部分死灰复燃。 条件致病菌感染比例增加。 多重耐药菌株不断出现，真菌感染的几率逐年增高。 ------临床病原体检查的重要性 临床病原体检查的目的：确定感染的发生和性质；及早明确诊断；早期提供治疗方案；采取预防措施防止感染传播。 第一节 标本的采集运送、实验室评价和检查方法 标本的正确采集和运送是实验室取得正确结果的前提和基本要素。但对标本采集的方法和时间，标本的来源，实验室常不能直接加以控制，因此，临床医师和护士必须对此予以高度重视。 病原检测标本采集与送检的基本原则： 采集标本须考虑选择标本的种类和采集部位并要反应有效病程。 尽量在抗生素使用前采集标本。 在采集标本时，应严格执行无菌操作，防止污染。 标本采集后尽快送到实验室，床边接种可提高病原菌的检出率。 盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。 处理后标本及容器按生物安全要求进行消毒处理。 一、常见检验标本的采集送检方法： （一）血液与骨髓 适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血症的病人。 1、通常采血部位为肘中静脉，但感染灶附近血管采血，可提高阳性率。切忌在静滴抗菌药物的静脉处采集血标本。标本采集过程应严格无菌操作。 （二）尿 液 1、中段尿采集：是临床上最常用的方法。采样前须以肥皂水和清水洗净尿道口，排出的尿液前段须弃去，而将中段或近后段的尿液留于无菌容器中。 （三）粪便 1、挑取有脓血粘液部分的新鲜粪便约2-3克盛于清洁容器中送检，也可用拭子挑取粪便插入运送培养基中送检，可提高病原菌的检出率。 2、对不易获取粪便者，如婴幼儿可用直肠拭子采集送检。 (四)痰液-最常见的呼吸道标本 1、自然咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽， 从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器内送检。痰量极少者可用45℃10%氯化钠液雾化吸入导痰，一般以清晨第一口痰为好。 2、气管镜下采集法、气管穿刺法：可减少污染，但病人有一定的痛苦，不易接受和推广。 （符合要求的痰标本在低倍视野中≤10个鳞状上皮细胞，≥25个白细胞） 3.痰标本采集后应及时送检和处理，最好不超过1小时，室温下延搁数小时，定植于口咽部的非致病菌呈过度生长，导致检出率则明显下降。另外上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结果分析时应予考虑。 （五）脑脊液等无菌体液 1.严格无菌条件下采集标本。 2.尽量采集多的标本送检。 3.尽快送检或床旁接种可提高阳性率，特殊标本需保温送检。 （六）创伤、组织和脓肿标本： 1、无菌生理盐水清洗病灶表面后，用无菌拭子取病灶深部的脓液和分泌物。 2、对未溃破的脓肿直接用碘酒、酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检，也可以切开排脓时用无菌拭子采样。 二、标本的质量评估标准： 标本及送检单上应注明被检人的姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验目的、抗生素使用情况等，无患者信息及标识的不予接收。 标本须及时送检，超过时限的标本不予接收。 送检容器须完整，有容器破损或标本渗漏的不予接收。 标本储存、运送方式不当的，不予接收。 明显被污染的标本不予接收。 标本量明显不足的标本不予接收。 除血培养之外的同一天内重复申请检验的标本不予接收。 三.临床病原体检查方法 其主要手段包括： 1.直接显微镜检查：重要的基本方法，常作为初步诊断但阳性率相对较低。 2.特异性抗原检查：可作为早期快速诊断，但特异性是关键。如免疫荧光技术、酶免疫技术、化学发光技术、胶乳凝集技术等。 3.核酸检查：近年来发展迅速，敏感性和特异性均较好。如PCR、分子杂交、DNA测序等。 4.病原菌分离培养和鉴定：常为确诊的关键步骤，但常较费时。 5.血清学检查：通过检测相应的特异性抗体以辅助诊断。如肥达氏试验、军团菌抗体检查等。应进行双份血清检测，两次抗体效价相差4倍以上有意义。 第二节 病原体耐药性检测 抗菌药物治疗的现状和存在的问题 使用增加，疗效下降 出现难以治疗的感染 加剧细菌耐药性 引起菌群失调，二重感染 滥用，污染造成危害 1.重点监测耐药菌株 (1)耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)和对万古霉素敏感性降低葡萄球菌(VIS) (2)高水平耐氨基糖苷类药物的肠球菌(HALR) (3)耐万古霉素肠球菌(VRE)、葡萄球菌(VRS)