宫颈癌实验室检查新进展.ppt

E5蛋白主要通过增强表皮生长因子受体(EGFR)的活性来实现致癌能力，其主要生物活性是通过与溶酶体ATP酶中的相对分子质量大小为16 000的脂蛋白结合来抑制EGFR的降解，EGFR得到积累,从而使EGF与EGFR作用后所激活的各种信号通路兴奋时间延长.放大了下游的MAPK信号 * * Adapted from Doorbar,JT. J Clin Virol 32:7-15, 2005 HPV L1 Protein is Lost During Progression to CIN2+ CIN 1 CIN 2 CIN 3 Virus Producing Less-productive Non-productive * HPV L1 细胞定位 Cellular localization of L1 protein in CIN I HPV L1 核内定位 DAB staining AEC staining) 临床的意义 细胞学 HPV L1 正常 异常 异常 正常 阴性 阴性 阳性 阳性 临床意义 无HPV感染或无临床意义 存在发展到CIN2+低风险 存在发展到CIN2+高风险 HPV感染阶段，但无疾病 * HPV E6/E7 mRNA检测 mRNA可代表病毒的转录活性，体现致癌风险 致癌作用使E2开放读码框损坏 癌基因E6/E7上游基因调节发生异常 E6/E7蛋白过表达 使p53、pRb等抑癌基因失活 检测癌基因表达可通过检测mRNA来实现 * * 细胞DNA定量分析 异常细胞核酸异常增生（含量增加） 核酸改变早于细胞形态改变 定量分析细胞DNA改变可以直接、简单、判断细胞是否发生癌变 自动化、智能化、标准化、且能够进行大规模筛查的客观筛查技术 * 细胞DNA定量分析 * 宫颈脱落细胞hTERC基因检测-FISH hTERC 基因在肿瘤发生、发展中发挥了一定作用 hTERC 对端粒酶活性至关重要,而端粒酶活性与肿瘤发生密切相关 在宫颈癌潜伏期即可检测到 hTERC扩增 hTERC 检测可用于宫颈癌早期诊断,且hTERC 扩增水平与肿瘤恶性程度呈正相关,可用于预测病情进展 宫颈癌可能发病机制 HPV E6、E7蛋白分别抑制 p53、pRb基因活性 HPV持续感染 HPV基因与宿主细胞相互作用 ↓ ↓ E2基因整合、 E2蛋白失活 引起E6、E7蛋白过表达 E5干预EGFR、促进病毒癌基因的转化功能 调节细胞hTERT转录、 激活端粒酶 细胞分化 失调 宫颈上皮内病变 宫颈癌 遗传因素/协同因子 图7 hTERC基因FISH结果图 扩增信号 对照信号 红绿信号比2 ：2（未扩增） 红绿信号比6 ：5（扩增） FISH 非放射性原位杂交技术 结果 10×40 红绿信号比6 ：2（扩增） 红绿信号比4 ：3（扩增） hTERC基因FISH结果图 10×40 HPV 甲基化 表观遗传是指非基因序列改变所致基因表达水平的变化,这种变化可通过减数分裂或/和有丝分裂遗传 表观遗传修饰影响细胞生长、分化、凋亡、转化以及肿瘤发展相关基因的转录 发现HPV的L1、L2 、 LCR等的甲基化在不同级别宫颈涂片中存在差异 甲基化检测的未来 希望通过HPV特定位点的定量甲基化状态的检测寻求其与HPV致病性的相关性 众多的HPV感染者中识别可能发展为宫颈癌前疾患或宫颈癌的患者 对这部分患者密切追踪或给以相应的治疗,这样既节约了医疗资源又提高了宫颈癌的防治效果 In advanced diseases , high percentage of methylation in certain genes are observed. Normal (正常) LSIL (轻度癌前病变) HSIL (重度癌前病变) SCC (侵袭癌) ? ? ? ? ? ? ? ? ● ● ● ● ● ● ● ● ? ? ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ○○○ ○★ ○ ○ ○ ○○○ ★ ★ ○ ○ ★ ○ ★ ○ ★ ★ ★ ○ ★ ★ ★ ○ ★ ★ ★ ○ ★ ○○○○○○○○○○○ ○★○○★○○○○○ ★ ★★ ★○★○○★○○★ ★★ ★★★★★★★★ * 基因甲基化是造成癌症的主因 * Con