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实验五、动物组织 一、目的与内容 (一)目的 1.了解动物的四类基本组织的结构特点,理解组织结构与机能的密切关系; 2.掌握血液涂片的方法。 (二)内容 1、上皮组织的观察:单层扁平上皮装片,小肠横切,纤毛上皮装片等; 2、肌肉组织的观察:平滑肌装片,骨骼肌横切,心肌切片等; 3、结缔组织的观察:疏松结缔组织装片,腱纵切,透明软骨等,自制人或蛙血液涂片等; 4、神经组织的观察:脊髓横切,运动神经元装片等。 二、材料与用品 (一)材料 蟾蜍,动物各组织的玻片标本[一般用苏木精一曙红(也称伊红)染色,简称H·E染色]。 (二)用品 1.器具 显微镜,解剖器具,蜡盘,载玻片,盖玻片,烧杯,染色缸,玻片架,蛙钉,采血针、棉花等。 2.试剂 0.65%生理盐水,甘油,香柏油,甲醇,吉姆萨染液或瑞氏染液,蒸馏水,乙醚、等。 三、操作与观察(一)血液涂片的制备与观察 (1)人或蛙血涂片标本的制备 ①取血:左手从蛙背面握蛙,右手持注射器从蛙胸部进针刺入蛙心脏采血。滴1滴在洁净载玻片右端,注意血滴不宜过大。(或者从人的左手无名指指端内侧取血。) ②涂片:另取边缘光滑的1块载玻片作推片斜置于第1块载玻片上血滴的左缘,成40。左右角度。将推片稍向右移,接触血滴,使血液充满两玻片之间的夹角。再将推片向左方匀速推进,使玻片上留下薄而均匀的血膜。左右摇动涂有血膜的玻片,使之尽快干燥,避免细胞皱缩。 ③染色:晾干后,用瑞特氏染液数滴加于涂片上固定染色1 min ,在染液的上面再加蒸馏水再染3min, 然后在染色玻片的一端用自来水细流缓缓冲去染液(在稀醋酸液中蘸数下),斜立血涂片于玻片架上,晾干后置显微镜下观察。 注意事项: 第一. 滴加瑞氏染液的量不宜太少,太少易挥发变干, 形成颗粒。1张血片,一般可滴加2~3滴染液。 第二. 冲洗时应将蒸馏水直接向血膜上倾倒,使液体自血片边缘溢出,沉淀物从液面浮去。切勿先将染液倾去再冲洗,否则沉淀物附着于血膜上不易冲掉。 蛙血涂片观察:在低倍镜下选择分布均匀的血细胞,换高倍镜观察。蛙红细胞呈椭圆形,中央有一椭圆形细胞核,呈蓝色,细胞质呈红色。此外还可见到白细胞和凝血细胞。 人的血涂片观察:红细胞数量最多,小而圆,无细胞核,其中央部分着色较周围淡;慢慢移动标本,可观察到各种白细胞,白细胞数量比红细胞少,但胞体大,细胞核明显,极易与红细胞区别开。血小板为形状不规则的细胞小体,其周围部分为浅蓝色,中央有细小的紫色颗粒,常聚集成群,分布于红细胞之间。高倍镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒,在油镜下才能看到颗粒周围的浅蓝色胞质部分。 (2)蛙血涂片的观察 分类:单层上皮和复层上皮 功能: 保护、感觉、分泌和吸收。 特征: (1)上皮细胞主要为柱状、扁平状。 (2)排列紧密,有单层和多层之分。 (3)细胞间紧密连接,间质少。 (4)基部分泌一层很薄的基膜。 1.上皮组织 (二)观察各组织制片 低倍镜观察,可看到许多大小不等的、圆形或椭圆 形的红色甲状腺滤泡。高倍镜观察,滤泡壁由1层 立方体形上皮细胞构成,核圆形、蓝紫色,位于 细胞中央,细胞质粉红色。 (1)单层立方上皮(图3—3)(兔甲状腺切片) (2)单层柱状上皮(图3—4)(猫小肠横切片) 低倍镜观察,可见黏膜面形成许多指状突起,突向管腔,突起表面覆有1层柱状上皮。 单层柱状上皮(胃、肠黏膜) 高倍镜观察,可见上皮细胞为柱状,核长椭圆形、蓝紫色,靠近细胞的基底部。把虹彩光圈缩小,减少光量,可见细胞的游离面有1层较亮的粉红色膜状结构,称为纹状缘。在柱状细胞之间散在有杯状细胞,此细胞上端膨大、下端细小,核呈三角形或半圆形,位于细胞基底部。在杯状细胞上端的细胞质内积有大量不着色的黏液,在切片上呈卵形空泡状结构,细胞游离面无纹状缘。 (3)假复层纤毛柱状上皮(兔气管横切片) 气管壁内表面即黏膜层由假复层纤毛柱状上皮组成。肉眼辨别切片中朝向气管腔的黏膜层,并置于视野中央。 低倍镜观察,管壁黏膜表面着色较深的一厚层即假复层纤毛柱状上皮。细胞排列紧密,细胞界限不清晰,细胞核位置高低不等。高倍镜观察,该上皮由4种细胞成。锥形细胞:基部宽,顶部窄,不能达到上皮游离面,细胞排列在个上皮的下部。梭形细胞:两端尖细,中间略宽,细胞核排列于整个上皮的中部。柱状细胞:胞体达上皮游离面,细胞游离面较宽,基部较细,细胞游离面有纤毛,细胞核排列于整个上皮的上部。 杯状细胞:夹于柱状细胞之间,游离面无纤毛,细胞核也排列在上皮的上部。 (4)复层扁平上皮(图3—6)(猫食管横切片) 复层扁平上皮位于食管壁内表面。 低倍镜观察,此上皮由许多
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