南京农业大学生化课件RNA生物合成.ppt

2. 复制眼的形成 由于复制原点都是在DNA分子的内部，而不是在末端，所以当复制启动后需要在复制原点处将DNA双螺旋局部解链，形成“眼状”结构 —— 复制眼。? （五）复制的过程 一.DNA的复制 复制眼的结构：? 复制眼形成后，其两端的叉子状结构称为复制叉。 2. 复制眼的形成 （五）复制的过程 一.DNA的复制 2. 复制眼的形成-双螺旋解开的过程 解螺旋酶使DNA双螺旋局部解链； SSB结合到解开的单链上； 拓扑异构酶Ⅱ向DNA中引入负超螺旋，以消除由解链产生的扭曲张力(动画)。? （五）复制的过程 一.DNA的复制 （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进 (1) 复制叉推进的方式 随着复制叉的推进，两条新链的合成方向是不同的： 一条链延伸的方向与复制叉前进的方向一致，它的合成能连续进行，称为前导链； （五）复制的过程 一.DNA的复制 另一条链延伸的方向与复制叉前进的方向相反，它显然不能被连续合成，需要复制叉推进了一定的长度，有了一段DNA单链后，才能以此为模板合成一个片段。因此这条新链的合成是不连续的，而且总晚于先导链，所以称为随后链。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进-复制叉推进的方式 这种前导链连续合成，随后链断续合成的方式，称为半不连续复制。 随后链中合成的多个DNA片段，称为冈崎片段。冈崎片段的长度原核细胞中约1000~2000个核苷酸，真核细胞中约100~200个核苷酸。? （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进-复制叉推进的方式 引物酶在复制原点附近合成一段RNA引物； DNA聚合酶Ⅲ (原核细胞)在引物的3末端逐个添加脱氧核苷酸。 随着复制叉的推进，亲代DNA双螺旋不断被解开，先导链也不断延伸。? ① 先导链的合成 （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进-复制叉推进的过程 ② 随后链的合成 引物的合成：随后链的每个冈崎片段都需要合成 RNA引物。也是由引物酶催化。? 冈崎片段的合成：DNA聚合酶Ⅲ(原核细胞)在引物的3末端使DNA链延伸，直至抵达其下游的另一个冈崎片段的RNA引物的5端。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进-复制叉推进的过程 ② 随后链的合成 冈崎片段的连结：DNA聚合酶Ⅰ一面以其DNA聚合活性在上游冈崎片段的3-OH末端添加脱氧核苷酸，一面以其5→3核酸外切活性切除引物，直至将引物全部切除。 DNA连接酶将最后的缺口补好。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进-复制叉推进的过程 ③ 先导链和随后链中DNA的延伸由同一个DNA聚合酶Ⅲ全 酶二聚体催化 随后链的模板回折成环，从而使冈崎片段的延伸方向与先导链的延伸方向一致，它们的3末端分别落在DNA聚合酶Ⅲ全酶的双活性部位。因此，随着聚合酶的移动，两条链同时延伸。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进-复制叉推进的过程 4.复制的结束 复制的终止没有特殊的信号 原核生物中： 其环状的DNA从单点开始双向复制，当两个复制叉在复制原点的对面处相遇并合并时，结束复制，形成两个环状DNA分子。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 4.复制的结束 复制的终止没有特殊的信号 真核生物中： 其线状的DNA上有多个复制原点，因此形成多个复制眼，复制叉的推进使复制眼增大，直至各个复制眼融合，复制终止，形成两个线状DNA分子。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 （六）DNA复制的忠实性 一.DNA的复制 差错率为10-9-10-10 新合成的子链与母链之间碱基配对严格性 使用引物RNA DNA聚合酶对底物专一性 DNA聚合酶的校对作用 5. DNA修复机制 二. DNA的损伤与修复 DNA分子的完整性对细胞至关重要，这一点是其它生物分子无法比拟的。在生物的进化中，DNA复制中可因DNA聚合酶催化作用引发出偶然的错误。环境因素（如辐射、紫外光照射、化学诱变物等）也可引起DNA序列上的错误，这些错误若不能予以改正而保留下来，会直接影响机体的生理功能，以致影响到后代的正常生长和发育。但是，生物体内存在有效的修复（repair）体系，保证了DNA复制的高度精确性。 二. DNA的损伤与修复 1. DNA损伤的原因 外环境中的射线：X-射线、紫外线等—— 高剂量的紫外辐射使DNA链上邻近的嘧啶核苷酸之间形成化学键，生成二聚体；此外还有脱嘌呤作用和脱氨基作用. 二. DNA的损伤与修复 2. 修复 所有细胞对DNA的损伤都有一定的修复