第13章食品中的天然毒素及检测.ppt

3.测定方法 （1）提取及净化 （2）测定 ①薄层板的制备 ②点样 ③展开 ④显荧光 ⑤观察与评定 4.计算 * 20，样品 200，具塞锥形瓶 50，乙腈，20min 滤液1 残渣1 25，乙腈 滤液2 残渣2 25，乙腈 滤液3 混合液蒸至50 250,分液漏斗 50,己烷 下层浓缩至10 50,水+5,15%三氯 化铁+1mol/l氢氧化钠 (pH4.6) 放于蒸发皿 水浴蒸干乙腈 上层溶液 15，二氯甲烷 共三次 混合二氯甲烷 水浴通风挥干 1，丙酮 样品待用 提取及净化 * （二）食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的测定 1.原理 小麦中DON经提取、净化、按浓缩和硅胶G薄层展开后，加热薄层。由于在制备薄层板时加入了三氯化铝，使DON在365nm紫外灯下显蓝色荧光，与标准比较定量。 2.试剂 3.测定 (1)提取 (2)净化 * (3)制备薄层层析用样液 (4)薄层层析 ①薄层板的制点 ②展开剂 ③样备 ④展开 ⑤显荧光 ⑥观察与评定 4.计算 * 20,样品 200,具塞锥形瓶 8,水+100,三氯甲烷- 无水乙醇(8:2) 滤液25于75蒸发皿 80-90℃水浴通风挥干 固体1 40,正己烷 固体2 20,甲醇-水(4:1) 正己烷溶液 甲醇溶液 下层甲醇-水过柱净化 净化液 (1)提取 * 五、 玉米赤霉烯酮 一、结构与性质 由镰刀菌属的菌种产生的代谢产物，又名F-2毒素，不溶于水、二硫化碳和四氯化碳，微溶于石油醚，溶于碱性溶液、苯、二氯甲烷、醋酸乙酯、乙腈和乙醇等。在波长360nm的紫外光下可发出蓝绿色荧光,在260nm的紫外光下绿色荧光更强。耐热性较强，110℃下，2小时能被完全破坏。 * 二、食品中的来源与分布 主要是镰刀菌属的菌株，广泛分布于世界各国的泥土、空气和污染的谷物中。 主要污染玉米，也可污染大麦、小麦、大米、小米、燕麦等粮食作物。 三、毒性与危害 对动物急性毒性较小，具有雌激素样作用，主要作用于生殖系统。 * 四、食品中的限量标准 巴西：不超过200ug/kg（玉米）；罗马尼亚：不超过30ug/kg（所以食品）；前苏联：不超过1000ug/kg（谷物、油脂）；我国目前尚未制定食品中的限量标准。 五、防止中毒的措施 ①对田间和贮存的玉米及其他谷物进行脱水干燥，贮仓要通风防潮、防霉，避免霉菌生长繁殖和产毒。 ②不用发霉的玉米加工食品，以保证食品的安全性。 ③不食用发霉变质的玉米及玉米制品，减少摄入的可能性。 * 六、检测 1.原理 样品磨碎后用三氯甲烷提取F-2毒素，在经液-液分配提纯，高效液相色谱分离，荧光检测器测定。 2.试剂 3.色谱条件 4.测定方法 （1）样品处理 （2）测定 * 20，粉碎样品 具塞锥形瓶 5，水+50，三氯甲烷 过滤，三氯甲烷层 10，无水硫酸铜(1h) 25滤液于分液漏斗 1mol/l氢氧化钠10 三氯甲烷层 1mol/l氢氧化钠10 氢氧化钠层1 氢氧化钠层2 氢氧化钠混合液 6，1.33mol/l磷酸 0.67mol/l磷酸调至 pH至9.5 混合液 15,三氯甲烷（3次） 5 g无水硫酸钠 滤纸过滤 蒸发皿水浴蒸干 流动相溶解残渣进样 样品处理 * 六、串珠镰刀菌素 与马脑白质软化症、猪肺水肿综合症、人类食管癌以及克山病等病因有关，对人类健康和畜牧业构成了巨大威胁。 一、结构与性质 水溶性化合物，通常以Na盐或K盐的形式存在于自然界中。 * 二、来源与分布 主要是串珠镰刀菌，其广泛分布于自然环境中，是侵害玉米及玉米制品等谷物食品和饲料的优势菌。污染程度因环境温度、湿度、光照、通风等情况的不同而异。 三、毒性与危害 对实验动物有强烈的毒性，毒素作用主要是危害心肌。对植物还有生长调节和毒性作用。 * 四、防止中毒的措施 ①及时对玉米、玉米制品等粮食进行烦躁处理，贮存粮库应注意通风、防潮、防霉，防止其等产毒真菌的污染、繁殖和产毒。 ②不用发霉玉米碾制玉米粉或自制发酵食品。 ③不食用有霉斑或有霉味的玉米及玉米制品。减少摄入的可能性。 * 五、食品中检测的方法 1.试剂 2.测定方法 （1）样品制备 （2）薄层板制备 （3）层析 （4）定性、定量分析 * 50，样品 索氏提取器，90 -95℃，回流30h 300，氯仿 挥干氯仿 80%甲醇水，300 93-95 ℃提取30h 40 ℃水浴旋转 蒸发至100 浓缩样 正己烷50， 20两次 甲醇水层浓缩近干 热甲醇溶解至10 2000 r/min,离心 上清液分析 样品制备 * 七、 伏马菌素 一、结构与性质 伏马菌素B（FB）从串珠镰刀菌培养物中分离出的一组新的水溶性代谢产物。共确定了FB1、FB2、FB3等的结构，FB1毒性最强。 * （2）花生油、香油、菜油等 称取4g混匀样品于小烧杯中，用20ml