第三章+血细胞分析仪检验.pptVIP

第二节 血细胞分析仪检验参数及临床应用 一、血细胞分析仪检验参数 二、血细胞分析仪检验参数的临床应用  第三节 血细胞分析仪检验图形及临床应用 一、血细胞直方图及临床应用 二、血细胞散点图及临床应用 第四节 血细胞分析仪性能评价与全面质量控制 一、血细胞分析仪的性能评价 二、血细胞分析仪全面质量控制 血细胞自动分析技术具有多参数、操作简便、高度自动化、精密度高、速度快、注重环保、较强的质控功能、智能化、有效的筛检正常人群的功能等特点。 血细胞分析仪（blood cell analyzer，BCA）是临床血液一般检查最常用的仪器，可进行全血细胞计数及其相关参数的检测。以往使用手工操作显微镜计数方法 1953年美国Coulter公司成功研制了第一台电阻抗式血细胞计数仪.目前，已形成血细胞分析流水线。 血细胞分析仪类型较多，根据对白细胞的分析程度可分为二分群、三分群及五分类；根据其自动化程度可分为全自动与半自动：全自动仪器可直接使用抗凝血；半自动仪器须预先稀释血标本。 第一节 血细胞分析仪检验原理目前，各类血细胞分析仪主要有两大功能：①血细胞计数功能。②白细胞分类功能。其检测原理为电阻抗法、激光散射法及多种方法联合应用。 一、血细胞计数原理（一）电阻抗法血细胞分析仪计数血细胞多采用电阻抗法，这也是发展中的血细胞分析仪设计的基础。 其基本检测原理是：血细胞具有相对非导电的性质，悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒通过计数小孔时可引起电阻及电压的变化，出现脉冲信号，脉冲的数量代表细胞的数量，脉冲的大小代表细胞的大小，从而对血细胞进行计数和体积测定，这种原理又称库尔特原理（coulter principle） 2．血细胞计数原理 将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中，将小孔管（也称传感器transducer）插进细胞悬液中，当接通电源后，位于小孔管两侧的电极产生稳定的电流，混悬细胞的稀释液可从小孔管外侧通过小孔管壁上的宝石小孔（直径＜l00μm，厚度约75μm）向小孔管内部流动。 当细胞通过小孔时，在电路中小孔感应区内电阻增高，于是瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。这些脉冲信号经过放大、阈值调节、甄别、整形、计数及自动控制保护系统，最终可打印出数据报告（图3-2，3-3）。 利用此原理可进行红细胞计数（RBC）、白细胞计数（WBC）、血小板计数（PLT）、红细胞平均体积（MCV）和血小板平均体积（MPV）测定等。 由于血小板和红细胞体积有明显的差异，很容易用一个限定阈值将两者同时测得的光电信号区分。因此，迄今全血法分析血小板与红细胞均采用一个共同的分析系统。 根据不同的阈值，计算机分别给出红细胞和血小板数量。但由于血小板和红细胞测量信号常有交叉，例如大血小板的脉冲信号可能被误认为红细胞而计数；小红细胞的脉冲信号可能进入血小板通道，误认为血小板而计数，造成实验误差。 为此，某些血细胞分析仪设置了一些特殊的装置。①扫流装置：仪器的红细胞计数微孔旁有一股持续的稀释液流，也叫扫流液体，其流向与计数微孔呈直角，使计数后的液体流走，可防止计数后颗粒重新进入循环而再次计数。 ②鞘流技术：避免计数中血细胞从小孔边缘流过及湍流、涡流的影响，保证血细胞单个依次通过计数孔。③浮动界标：通过调节红细胞与血小板间的阈值，避免小红细胞及大血小板对计数的干扰 3．红细胞及血小板的其他参数检测 ①血细胞比容（HCT）采用脉冲高度叠加经换算得出，或采用红细胞平均体积（MCV）与红细胞数相乘得到。②红细胞平均体积（MCV）、血小板平均体积（MPV）由仪器直接测定导出。 ③MCH及MCHC由MCV值与仪器直接检测的红细胞数和血红蛋白含量经计算得到（MCH=HBG/RBC，MCHC=HBG/HCT）。 ④红细胞体积分布宽度（red cell volume distribution width，RDW）是由血细胞分析仪测量细胞体积后获得。 RDW是红细胞体积异质性的参数，即反映红细胞大小不等的客观指标。 RDW多采用RDW-CV和RDW-SD表示。RDW-CV易受红细胞体积大小的影响（CV=SD/x），不能真实反映红细胞的大小及离散情况，而RDW-SD可弥补这一不足 电阻抗法的缺点：①不能探测单个红细胞的结构。②由于MCHC数据来源于MCV的测量结果，而MCV测量受细胞体积以外诸因素的影响，最终造成MCHC的误差。 ③红细胞通过小孔时都经受一定的形态变化，红细胞形态与细胞质黏度有关，细胞质黏度受血红蛋白含量影响，故血红蛋白浓度可影响红细胞形态，也影响MCV及MCHC的准确性。④血小板计数常受大血小板和非血小板颗粒（如小红细胞、红细胞碎片等）的干扰。 （二）流式细胞术与激光检测原理1．白细胞计数原理 利用流