快速检测蜡样芽胞杆菌及其毒力基因筛选.PDF

疾病监测 2019 年 7 月 30 日第 34 卷第 7 期 DISEASE SURVEILLANCE, July 30, 2019, Vol. 34, No. 7 • 1 •     ** 快速检测蜡样芽胞杆菌及其毒力基因筛选 张慧娟，张恩民，贺金荣，李伟，魏建春 摘要：  目的    筛选蜡样芽胞杆菌鉴定基因和快速检测毒力基因。 方法    选择分离自食品和土壤的代表性蜡样芽胞杆菌共 329株，聚合酶链式反应（PCR）方法检测gyrB 和groEL 基因的种特异性，检测毒力基因在菌株中的分布特征。 基于检测结果，用 多重PCR检测方案快速检测蜡样芽胞杆菌鉴定基因及其毒力因子。 结果    在蜡样芽胞杆菌及其近缘芽胞杆菌中，除1株苏云 金芽胞杆菌扩增阳性外，gyrB 基因具有蜡样芽胞杆菌种特异性；而groEL 基因在4种芽胞杆菌中均有扩增。 6种毒力基因 nheA、entFM、bceT、hblC、cytK 和ces 的携带率分别为84.19%、79.64%、49.24%、47.72%、47.11% 和 1.52%。 选择nheA、hblC、 entFM、ces、cytK 和gyrB 用于快速鉴定蜡样芽胞杆菌及其毒力基因，获得了双重PCR扩增体系（gyrB 和cytK ）与4重PCR扩增 体系（nheA、hblC、entFM 和ces ）的最佳检测方案。 结论    筛选的蜡样芽胞杆菌鉴定基因和毒力基因能够全面、特异、简便、高效 地检测蜡样芽胞杆菌，可为食品安全检测及快速诊断提供依据，在实际检验工作中具有良好的应用前景。 关键词：  蜡样芽胞杆菌；鉴定基因；毒力基因；多重PCR 中图分类号: TS201.3 文献标志码: A 文章编号: 1003−9961（2019）07−0001−04   Screening specific genes and virulence genes of Bacillus cereus for its rapid identification and detection    Zhang Huijuan, Zhang Enmin, He Jinrong, Li Wei, Wei Jianchun. State Key Laboratory of Infectious Disease Prevention and Control, National Institute for Communicable Disease Prevention and Control , Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 102206, China Corresponding author: Wei Jianchun, Email: weijianchun@ Abstract:    Objective    Toscreen the specific genes and virulence genes of Bacillus cereus for its rapid identification and detection. Methods    A total of 329 B. cereus strains isolated from food and soil were used to evaluate the specificity of gyrB and groEL genes for the identification of B. cereus and investigate the distribution of virulence genes with PCR method. The appropriate genes were selected to develop a multiplex PCR assay for rapid detection of B. cereus. Results    Among the studied B. cereus and closely related Bacillus strains, gyrB gene was specific for B. cereus except for one B. thur