低温胁迫对小麦叶片抗寒性的影响.docVIP

低温胁迫对小麦叶片抗寒性的影响 姓名 （学校 学院 城市邮政编码） 【摘 要】：研究低温胁迫对小麦叶片抗寒性的影响。以小麦叶片为材料采用电导法测定植物组织的抗逆性，以及通过植物组织中过氧化物酶活性的测定来分析低温胁迫对小麦叶片抗寒性的影响。经电导法测定小麦叶片的伤害率为32.87%，低温处理前的过氧化酶活性为9040U，处理后的活性为6080U，与邻组相比我组测得的小麦伤害率较高，通过过氧化酶活性的测定可知小麦叶片具有一定程度的抗寒性。 【关键词】：低温；小麦；抗寒性；电导法；过氧化酶 0 前言： 作为世界和我国的主要粮食作物， 几乎所有冬小麦种植都有冷害和冻害发生， 成为小麦生产上最大的自然灾害之一。 小麦在整个生长发育过程中，需要外界有一个适宜的温度范围。当外界气温和地温明显地狱小麦所需的适宜温度，接近或超过其在这一时期生理状态所能忍受的极限最低温就会造成胁迫和伤害。[1] 目前。 对小麦抗寒性的研究 已总结出许多度量指标 ， 但细胞膜是对逆境最敏感的原始反应部位， 低温胁迫时， 被伤害的关键部位是膜系统 。[2] 。低温胁迫对膜破坏的程度 ， 即对膜透性的影响， 在研究小麦抗寒性方面是至关重要的指标。目前电导法已成为小麦抗性栽培、 育种上鉴定小麦抗逆性强弱的一个方法。[3] 过氧化物酶是植物保护酶之一，它和超氧化物歧化酶 ( S O D) 、 过氧化氢酶( C A T )，等组成植物 的防御系统。因此过氧化物酶的活性也可反映小麦的抗寒性。 材料与方法 材料 小麦(wheat) 1.2 方法 (一)电导法测定植物组织抗逆性 1、将小麦叶片置于-20摄氏度冰箱中冷冻处理10分钟作为处理，另一份小麦叶片置于室温做对照。 2、各加20ml蒸馏水，用注射器抽气使叶片下沉入水下，浸泡10分钟后测电导率（S1），用微波炉煮沸后测电导率（S2）. （二）植物组织过氧化物酶活性的测定 1、酶液的制备 取0.5g叶片、加入少量磷酸缓冲液研磨至匀浆，转入离心管中，4000r、离心10min,然后取上清液定容至10ml,备用。 2、过氧化物酶活性的测定 酶活性测定的反应体系，包括2.9ml0.05M磷酸缓冲液；1ml 2%H2O2；1.0ml 0.05M愈创木酚和0.1ml酶液。用加热煮沸5min后的酶液作对照，反应体系加入酶液后，立即于37摄氏度水浴中保温15min，并加入20ml 20%的三氯乙酸终止反应，然后于470nm波长下测定吸光值。 生理指标的测定方法 外渗电导率测定：电导法[4] 植物组织受到逆境伤害时，由于膜的功能受损或结构破坏，而使其透性增大，细胞内的盐类或有机物将有不同程度生出，从而引起组织浸泡液电导率发生变化。 通过测定外渗液电导率的变化，就可以反映出质膜的伤害程度和所测材料抗逆性的大小，伤害越重，外渗越多，电导率的值也就越大。 过氧化物活性测定：愈创木酚法[5] 在过氧化物酶的催化下，过氧化氢将愈创木酚氧化成茶褐色产物。此产物在470nm处有最大吸光值。故通过测470nm下的吸光值变化测定过氧化物酶的活性。 结果与分析 表1 测电导率的原始数据 CK（μs／um） 冷冻（t）（μs／um） S1 44.8 147 S1 199 226 S0 5.8μs／um 公式： L=(St1-S0)/(St2-S0) 伤害度（%）=（Lt-Lck）/（1-Lck）×100 经计算Lt=0.4642μs／um ；Lck=0.2019μs／um；伤害率为32.87%。 表2 测过氧化物酶活性的原始数据 1 2 平均 CKOD470 0.461 0.442 0.452 冷冻OD470 0.312 0.295 0.304 公式： 过氧化物酶活性=（ΔA470×Vt）/(W×Vs×0.01×t) 经计算CK：过氧化物酶活性为9040U;冷冻：过氧化酶活性为6080U 表3 低温胁迫下小麦叶片生理指标的测定结果 品种 温度（℃） 过氧化物酶活性 电导率(L) 伤害度(%) （U） （μs／um） 小麦 室温 9040 0.2019 32.87 叶片 —20 6080 0.4642 外渗电导率的变化 冷冻后的小麦叶片的外渗电导率比室温的要大；煮沸后的小麦叶片的外渗电导率比煮沸前的要大。也就说明当植物受到逆境影响时，如高温或低温、干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物细胞浸提