食品微生物检验课程设计方案指导书(2).docVIP

 吉林工程技术师范学院  食品工程学院  《食品微生物检验》 综合实训   设计题目：《国标》沙门氏菌检测 学生姓名：王 林  班级学号：34 号  指导老师：金明晓 王陆玲    2012年11月30日 食品微生物检验综合实训 前言本标准代替 GB/T 4789.4-2008《食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验》。本标准与 GB/T 4789.4-2008 相比，主要变化如下——修改了标准的中英文名称；——修改了标准的范围；——修改了培养基和试剂；——修改了设备和材料；——修改了附录 A。本标准的附录 A、附录 B 为规范性附录。本标准所代替的历次版本发布情况为：——GB 4789.4-84、GB 4789.4-1994、GB/T 4789.4-2003、GB/T 4789.4-2008。 食品安全国家标准食品微生物学检验 沙门氏菌检验1 范围本标准规定了食品中沙门氏菌（Salmonella）的检验方法。本标准适用于食品中沙门氏菌的检验。2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：冰箱：2 ℃～5 ℃。恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，42 ℃±1 ℃。均质器。振荡器。电子天平：感量 0.1 g。无菌锥形瓶:容量 500 mL，250 mL。无菌吸管：1 mL（具 0.01 mL 刻度）、10 mL（具 0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。无菌培养皿：直径 90 mm。无菌试管：3 mm×50 mm、10 mm×75 mm。无菌毛细管pH 计或 pH 比色管或精密 pH 试纸。全自动微生物生化鉴定系统。?培养基和试剂缓冲蛋白胨水（BPW）：四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液?亚硫酸铋（BS）琼脂?HE 琼脂木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂沙门氏菌属显色培养基。 三糖铁（TSI）琼脂 蛋白胨水、靛基质试剂 尿素琼脂（pH 7.2） 氰化钾 （KCN） 培养基 赖氨酸脱羧酶试验培养基 糖发酵管 邻硝基酚-D 半乳糖苷（ONPG）培养基 半固体琼脂 丙二酸钠培养基 沙门氏菌 O 和 H 诊断血清 生化鉴定试剂盒课程目的：掌握沙门氏杆菌的国家标准检查方法 课程意义：  通过对本课程设计的学习，要求学生掌握食品微生物检验的基础理论知识、沙门氏杆菌常规的检验原理，了解检验新技术的发展概况；并通过检验操作技能的训练，正确掌握微生物检验的方法和技能，包括微生物检验常用器材的使用方法和技能、生化试验和血清学试验方法和技能、微生物检验的样品处理技术、食品微生物卫生指标菌沙门氏杆菌的检验和报告的撰写等内容，对《中华人民共和国国家标准　食品卫生检验方法　微生物部分》（简称国标）具有较强的应用能力和执行能力，使学生能较好地胜任食品微生物检验的有关工作。同时还重视学生的职业道德教育和法制教育，重视培养学生的诚信品质、敬业精神和责任意识、遵纪守法意识、团结合作意识，以提高学生的实践能力、创造能力、就业能力，为毕业后的就业打下良好的基础。材料准备： 　　1．器材：灭菌锅、干燥箱、水浴锅、温箱、冰箱、?电子天平、无菌吸管、三角瓶、培养皿、试管、无菌毛细管、精密pH试纸、酒精灯、接种环等。　　2．培养基：缓冲蛋白胨水（BPW）、四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）、亚硫酸铋琼脂（BS）、木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂、HE琼脂、三糖铁琼脂（TSI）、蛋白胨水（靛基质试验用）、 ?赖氨酸脱羧酶试验培养基、尿素琼脂、ONPG培养基。 方法步骤:（一）培养 　　前增菌牛乳称取25?mL样品放入盛有225?mL?BPW的无菌锥型瓶中，振荡混匀。于36℃?士1℃?，18h进行培养。 1、增菌? 对已污染的被检材料牛乳等先用煌绿增菌培养基增菌培养后再进行分离。37℃培养18～24h，观察其在各种培养基上的菌落特征。?轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1?mL，转种于10?mLTTB内，于42℃?士1℃?培养18h一24h。 2、分离培养?分别用接种环取增菌液1环，划线接种： 二个BS琼脂平板 36℃?士1℃? 40h一48h 二个XLD琼脂平板 36℃?士1℃? 18h一24h 二个HE琼脂平板 36℃?士1℃?