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5 第四章 动物生物技术及其应用47.ppt 47页

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* 1 疫苗制备技术的发展 * 1.1 第一代疫苗---传统疫苗 利用病原体减毒弱化或灭活制备的疫苗,19世纪中叶一直沿用至今.如百日咳杆菌疫苗,白喉杆菌疫苗,破伤风杆菌疫苗,结核杆菌疫苗(卡介苗)等.第一代疫苗对预防传染病的传播作出了巨大的贡献. 缺点:存在安全隐患.生产过程大量繁殖的病原体对工作人员是严重威胁;使用中偶见因病毒或灭活不彻底而导致被免疫者感染的报道. * 1.2??第二代疫苗---基因工程疫苗 将病原体的抗原(蛋白质)基因克隆在细胞或真核细胞内,利用细菌或细胞内抗原基因表达的产物作为抗原的疫苗. 优点: 利用抗原而不是利用病原体制备疫苗,安全性高; 把同一病原体的不同抗原决定簇重组在一个基因中,以表达含不同抗原决定簇的多表位抗原,提高免疫效果; 将不同病原体的抗原克隆于同一工程苗或工程细胞,以表达不同病原体的抗原,制备成多价疫苗. * 1.3 第三代疫苗--核酸疫苗 (DNA疫苗,基因疫苗) 将含有编码蛋白质基因序列的质粒载体经肌肉注射或微弹轰击等方法进入人体内,通过宿主细胞表达系统表达抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的. 1990年首先报道了小鼠肌肉注射质粒DNA被细胞摄取,质粒中的基因可以表达,此后研究便迅速开展. 兼有基因工程疫苗的安全性和减毒灭活疫苗激发机体强免疫反应的特点,免疫效果持久,制备简单,使用方便,前景广阔. * 2??乙型肝炎疫苗 2.1 乙型肝炎的严重性 已发现甲,乙,丙,丁,戊5种肝炎病毒.尚未确定是否与肝炎有关的还有己,庚,辛3种病毒. 全世界肝炎病毒携带者5亿,以乙肝最多,达2亿人.乙肝病毒携带者可能转移为慢性肝炎,发生肝癌的比例是非携带者的50倍. 我国是乙肝多发区.乙肝无特效药,HBV携带者也无理想的消除措施.乙肝疫苗可以阻断HBV传播和降低人群慢性携带率. * 2.2 乙型肝炎疫苗 血源性疫苗 1982年首次在美国面市.从人携带者的血液中分离出病毒,经灭活后制成.受血液来源和技术限制,数量少,价格高,难推广.另外,由于是血源制品,安全无保障.有些国家已禁止使用,避免受艾滋病病毒传染. 基因工程疫苗 1981年成功克隆乙肝表面抗原(HBsAg)基因并获得大量表面抗原.1986年美国批准基因工程乙肝疫苗上市.方法:①重组DNA导入酵母菌,由酵母菌产生乙肝抗原而制成疫苗;②重组DNA导入仓鼠细胞,由仓鼠细胞生产疫苗. 我国采用酵母表达系统表达乙肝表面抗原制备疫苗,也建立了哺乳细胞的高效表达系统. * 3?核酸疫苗 丙型肝炎疫苗 大部分丙型肝炎病人可发展为肝硬化和肝癌,无特效治疗药物和预防方法.丙型肝炎病毒基因型多,突变率高,至今未见疫苗上市. Tokushige采用丙肝病毒C区基因构建重组DNA,免疫小鼠检测到抗丙肝抗体.还可诱发产生细胞免疫反应. 艾滋病病毒疫苗 全称人类获得性免疫缺陷综合症,由人类免疫缺陷病毒HIV感染引起.美国新DNA疫苗公司宣称开发一种HIV的DNA疫苗,将HIV-1病毒的tat和vpr基因以及nef和gp160基因部分序列克隆于质粒上.这种疫苗能激发人体从受感染的组织中清除病毒的攻击. 刘德武专题 * 流感病毒疫苗 极易发生变异,包膜蛋白的易变性使流感病毒能逃避中和抗体的作用,因而出现流感周期性大流行. 将流感病毒高度保守的NP基因插入质粒,注射BALB/C小鼠肌肉,可诱发小鼠对流感病毒产生抗体免疫反应和细胞免疫反应. 思考:你对禽流感的看法? ? ? ? * 五.基因治疗(gene therapy) 人类遗传疾病有5000多种,基本上不可能用常规方法治疗.个别病例只能对症疗法,减轻症状,但不能治愈.基因治疗可能是唯一的方法. 基因治疗是向靶细胞导入外源基因,以纠正或补偿基因的缺陷,达到治疗遗传病的目的. 1990年美国批准治疗腺苷脱氨酶(ADA)的临床治疗方案,2个病例症状有改善. 1991年复旦大学与第二军医大学合作用基因疗法治疗血友病B的临床试验,患者症状有所改善. 刘德武专题 * 1.基因治疗的类型 基因调控治疗 从基因水平调控缺陷基因的表达,以达到改善症状的目的. 镰型细胞贫血症是因珠蛋白的β链基因突变,产生不正常的血红蛋白所致.用5-氮胞苷抑制甲基化酶,使因甲基化而关闭的γ基因重新开放,产生HbF以代替HbA. 用抑制基因表达的反义RNA或能切割RNA的核酶(ribozyme),阻断基因的表达.在肿瘤的治疗上,可以在基因水平上抑制肿瘤细胞基因的恶性表达和引导肿瘤细胞逆转. 刘德武专题 * 基因矫正治疗 基因增补—将正常基因导入患者体内,补偿缺陷基因的功能. 基因替换—以正常基因取代变异的基因. 基因修复—对异常基因进行原位的特异性修复. * 2.基因治疗的条件 对导入的基因及其产物有详尽的了

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