高中生物 第四章 生物化学与分子生物学技术实践 第10课时 分子生物学技术同步备课名师课件 苏教版选修1.pptVIP

答案 解析 (2)如果只需要大量克隆模板DNA中间的某个特定区段，应该加入 种特定的引物。当温度降低至55 ℃时，引物与两条“舒展”的模板链的特定位置结合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的 端连接脱氧核苷酸，两条子链的延伸方向都是 。 两 3′ 从子链的5′端向3′端延伸 解析　PCR分为三个基本反应步骤：变性(94 ℃)、退火(55 ℃)、延伸(72 ℃)，其特异性依赖于与靶序列互补的引物，引物是两段与待扩增DNA序列互补的片段，两引物之间的距离决定扩增片段的长度。由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的3′端延伸DNA链，则DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 解析　PCR技术与细胞内的DNA复制不完全相同，除了需要模板、原料、酶以外，至少还需要液体环境(稳定的缓冲溶液)，每一个步骤都需要适宜的温度和酸碱度等。 答案 解析 (3)PCR技术的必需条件，除了模板、原料、酶之外，至少还有三个条件，即液体环境、适宜的 和 ，前者由 自动调控，后者则靠 来维持。 温度 酸碱度 PCR仪 缓冲液 解析　一个DNA分子连续复制四次之后，形成16个DNA分子，15N标记的DNA分子有2个，则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例为1/8。 答案 解析 (4)通过PCR技术使DNA分子大量复制，如果将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制四次之后，则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例是 。 1/8 问题导析 问题导析　(1)解旋是使DNA双链间的 键断裂，PCR技术是利用DNA的 原理，细胞内是在 酶的作用下解旋。 (2)DNA分子不论复制几次，含有15N标记的DNA分子都只有 个。 答案 返回上页 氢 热变性 解旋 2 课堂小结 放入PCR仪扩增 引物 复性 当堂检测 1.PCR利用了DNA的哪种特性来控制DNA的解聚与结合 A.特异性 B.稳定性 C.热变性 D.多样性 √ 2 3 4 5 1 答案 2.符合PCR反应条件的一项是 ①稳定的缓冲液环境　②DNA模板　③合成引物　④四种脱氧核苷酸　⑤DNA聚合酶　⑥DNA解旋酶　⑦限制酶　⑧温控设备 A.①②③④⑤⑥ B.①②③④⑤⑥⑦⑧ C.③④⑤⑥⑦⑧ D.①②③④⑤⑧ √ 答案 解析 2 3 4 1 5 解析　PCR反应模拟了生物细胞内DNA复制的条件，只是无需解旋酶(可热变性)，也不需要基因工程的工具酶(限制酶)。 解析　PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，在高温条件下，把DNA的双链打开，缓慢冷却后，又重新结合，需要耐高温的DNA聚合酶，同时，还需要引物，从引物的3′端连接脱氧核苷酸。 3.下列关于PCR的描述中，正确的是 ①PCR是一种酶促反应　②引物决定了扩增的特异性　③扩增DNA利用了热变性的原理　④扩增的对象是氨基酸序列 A.①②④ B.②③④ C.①③④ D.①②③ √ 答案 2 3 4 1 5 解析 4.如图所示为PCR扩增的产物，请分析此产物是哪次循环的产物 A.第一次循环 B.第二次循环 C.第三次循环 D.第四次循环 解析 2 3 4 1 √ 答案 5 解析　在PCR反应中，以引物为标记，第一次循环时，以加入的DNA为模板，两条DNA链可分别由引物Ⅰ和引物Ⅱ与其结合并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以形成的DNA中只有一种引物；从第二次循环开始，上次产生的DNA分子又可作为模板参与反应，所以会形成DNA分子两端均含引物的情况，如下图所示，因此题干中所出现的情况是第一次循环的产物。 2 3 4 1 5 5.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列问题： (1)DNA的两条链是反向平行的，通常将 的末端称为5′端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的 开始延伸DNA链。 解析　一条脱氧核苷酸链一端是游离的羟基，另一端是游离的磷酸基团，含羟基的一端是3′端，含磷酸基团的是5′端。引物的5′端与模板链的3′端结合，然后沿着引物的3′端延伸。耐高温的Taq DNA聚合酶的发现是实现PCR的关键，该酶可以利用选择培养基从一些微生物中分离出来。PCR一次循环要经历变性、退火和延伸三个阶段。 答案 解析 磷酸基团