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例胃粘膜EB病毒感染的检测 来源：青年人(Qnr.Cn)更新时间：2010-3-1718:15:30【字体：小大】 　　EB病毒是一种肿瘤病毒，与人类鼻咽癌、淋巴瘤关系密切。近年来EB病毒相关性胃癌在国外已有报道。本文通过胃镜活检，对91例胃粘膜行PCR方法检测EB病毒感染。　　一、材料与方法：91例患者均为我院1996年3月～6月门诊及住院胃镜检查者。男58例，女33例，年龄18～75岁，平均42岁。胃镜为日本Olympus　EVIS－230型，DNA扩增仪为美国PE公司PCR－2400型。EB病毒检测试剂盒为广州中山医科大学达安基因诊断中心生产。活检取材部位为病变组织，溃疡与粘膜交界处。如无溃疡及新生物，常规取胃窦粘膜分别做EB病毒检测及尿素酶试纸反应。PCR方法：将组织捣碎研磨，经生理盐水洗涤、离心、加入50μl提取液混匀，100℃沸水浴5分钟，取出迅速置冰浴变性。反应条件为93℃45秒，55℃45秒，72℃60秒，共35个循环，最后置72℃再延伸5分钟。电泳检测：扩增后经2%的琼脂凝胶电泳20～30分钟后在紫外检测仪下观察，在154bp处出现橙黄色条带(与阳性对照处于同一位置)为EB病毒阳性。统计学用χ2检验及四格表确切概率分析。　　二、结果：91例标本中EB病毒阳性19例(20.88%)，阴性72例(79.12%)。EB病毒阳性组内镜、组织学及快速尿素酶试验结果见附表。EB病毒阳性组19例中发现肿瘤3例(15.79%)，EB病毒阴性组72例中发现肿瘤3例(4.17%)，经统计学处理两组肿瘤检出率有明显差异(P＜0.05)。91例尿素酶试验阳性为65例(71.43%)，EB病毒阳性与阴性两组间无显着差异。EB病毒阳性组的3例肿瘤分别是非何杰金氏淋巴瘤，胃中分化腺癌及印戒细胞癌。EB病毒阳性的良性病变中胃溃疡4例，球溃4例，复合溃疡2例，胃炎4例，残胃炎并肠上皮化生2例。EB病毒阳性组良性溃疡，炎症及癌前病变的切片镜下有明显的炎性细胞浸润，以大量淋巴细胞浸润的有12例(12/19，63.16%)。　　讨论　一般认为，人类几乎100%感染过EB病毒。近年来人们对慢性活动性EB病毒感染与肿瘤的关系日益重视，根据分子生物学的研究，证明EB病毒感染与恶性肿瘤及自身免疫性疾病密切相关［1］，恶性肿瘤中有Burkitt淋巴瘤，何杰金氏淋巴瘤及非何杰金氏淋巴瘤、胃癌等。本文91例胃粘膜活检中EB病毒阳性组肿瘤所占比例与阴性组比较有显着性差异。3例EB病毒阳性肿瘤中，1例为非何杰金氏淋巴瘤(胃体部)，2例为胃癌(胃底及胃窦部各一例)。胃及十二指肠球部溃疡，粘膜糜烂等良性病变检出EB病毒11例(57.9%)， 附表　19例胃粘膜活检EBV阳性的临床、内镜、病理及HP特点 编号 临床诊断 内镜诊断 病理诊断 快速尿素酶试验 1 功能性消化不良 大致正常胃粘膜相 浅表性胃炎 - 2 上消化道出血 进展期胃癌(Borrman　Ⅰ型) 中分化胃腺癌大量淋巴细胞浸润 + 3 上消化道出血 复合溃疡 符合胃溃疡 ++ 4 慢性胃炎 红斑充血性胃窦炎 慢性活动性胃炎 - 5 溃疡病 球部前壁溃疡(A1） 少量坏死组织及炎性细胞浸润 ++ 6 胃癌 胃体多发性隆起病变 非何杰金氏淋巴瘤 - 7 溃疡病 球部前壁溃疡（A2） 符合慢性溃疡 + 8 慢性肾功能衰残胃炎 扁平糜烂性残胃炎 萎缩性胃炎并肠上皮化生 - 9 溃疡病 幽门溃疡 符合胃溃疡 － 10 胃溃疡 胃小弯溃疡(A2） 符合胃溃疡 ++ 11 功能性消化不良 隆起糜烂性胃窦炎 慢性活动性胃炎 + 12 溃疡病 球部大弯溃疡(H1） 坏死组织及炎性细胞 - 13 溃疡病并出血 胃窦溃疡(H1） 胃溃疡 + 14 上消化道出血并休克 胃窦溃疡并出血(A1） 胃溃疡 + 15 慢性胃炎 隆起糜烂性胃炎(窦体) 浅表性胃炎伴大量淋巴细胞浸润 + 16 球溃 十二指肠球炎 十二指肠Brunners腺增生 + 17 残胃炎 吻合口炎 慢性活动性胃炎并肠上皮化生 - 18 肝硬化食管静脉曲张 门脉高压性胃病，食管静脉中度曲张 慢性活动性胃炎 - 19 溃疡病 胃角溃疡 印戒细胞癌 + 　　良性或恶性病变的组织学切片镜下都见大量淋巴细胞浸润。EB病毒相关的鼻咽癌、胃癌、胸腺癌、肺癌及唾液腺癌等上皮组织致癌的机制尚不清楚，有文献认为EB病毒是通过淋巴细胞浸润到达上皮。许多肿瘤与抑癌基因和癌基因的表达异常有关，但EB病毒相关胃癌的基因包括复制错误的异常极少，就是说EB病毒的致癌性更确切［2］。本组资料还提示EB病毒阳性组萎缩性胃炎及肠上皮化生检出率明显高于阴性组，与柳井秀雄的报告相符［3］。　　EB病毒相关胃癌的发现提供了一种新的胃癌发病机制的研究途径，对胃镜活检标本检测EB病毒有助于提高对EB病毒在胃