第十一章 核糖体(精要部分).pptVIP

第十一章 核糖体和蛋白质合成 核糖体(ribosome)是合成蛋白质的无膜包被细胞器，其唯一的功能是按照mRNA的指令由氨基酸高效且精确地合成多肽链。 核糖体几乎存在于一切细胞内，游离于细胞质基质中，或附着于内质网膜及核膜上（真核细胞）。 ?第一节 核糖体的类型与结构 ?第二节 多聚核糖体与蛋白质的合成 第一节 核糖体的类型与结构 ?一、核糖体的基本类型与成分 ?二、核糖体的结构 ?三、核糖体蛋白质与rRNA的功能分析 一、核糖体的基本类型与成分 （一）核糖体基本类型 ?附着核糖体 ?游离核糖体 ?原核细胞70S的核糖体 ?真核细胞80S的核糖体 每种核糖体都由大小两个亚基组成，每个亚基都含有蛋白质和rRNA。 1. 70S核糖体 原核细胞核糖体沉降系数为70S，2*106 离子浓度对大小亚基的结合起重要作用，对70S核糖体体外实验表明： －Mg2＋浓度小于1mmol/ml 时，解离成大（50S）小（30S）亚基解离； －Mg2＋浓度大于10mmol/ml 时，两个70S核糖体构成100S的二聚体； 真核细胞中线粒体和叶绿体内自身核糖体70S 2. 80S核糖体 80s核糖体和70s形态总体结构基本相似。大亚基中28SrRNA在不同的物种中大小有差别。 60S：28S、5.8S、5S rRNA； 40S：18SrRNA。 》尽管原核生物与真核生物核糖体的蛋白质和rRNA差异很大，但结构总体相似，特别是负责与mRNA结合的小亚基。 》原核和真核细胞的rRNA都具有甲基化现象，这种甲基化与RNA的转录后加工过程的酶识别有关。 》另外原核5S、16S rRNA和真核5.8S、18S rRNA结构高度保守，常用于研究生物进化。 （二）核糖体的主要成分 ?r蛋白质：40%，核糖体表面 ?rRNA: 60%,，核糖体内部 1.核糖体RNA 原核生物的核糖体含有三种大小不同的 rRNA，在小亚单位中的为 16s rRNA，在大亚单位中的为23S renal和 5S rRNA。 真核生物的核糖体含有4种rRNA，在小亚单位中的为18S rRNA，在大亚单位中的为 28S、5S和 5.8S rRNA。 rRNA具有高度复杂的二级结构，线性rRNA分子内部有70％的区段形成了双链螺旋。各种蛋白质则结合到折叠的rRNA分子上。 2.核糖体蛋白 大肠杆菌核糖体中共含有50多种蛋白质，其中小亚单位约有21种，大亚单位含有30余种，组成核糖体的蛋白质，在大小亚单位中均有一定的空间分布。 真核生物的核糖体所含有蛋白质的种类比原核生物的要多一些，大亚单位含有49种，小亚单位含有33种，共计约80余种。 二、核糖体的结构 在电镜下，核糖体具有一定的三维形态，且每一核糖体均由大、小两个亚单位构成。 大亚单位略呈半圆形，直径约为23纳米，在一侧伸出三个突起，中央为一凹陷； 小亚单位呈长条形，在约 1／3长度处有一细的缢痕，将小亚单位分为大小两个区域。 当大小亚单位结合在一起成核糖体时，其凹陷部位彼此对应，从而形成一个隧道，为蛋白质翻译时mRNA的穿行通路。 6SrRNA基因的常用途径 细菌的rRNA具有高度的保守性，又具有高度的变异性。保守性反映物种的亲缘关系，高变性则揭示物种的特征核苷酸序列， rRNA是种属鉴定的基础。因此，可利用保守区设计通用引物扩增细菌的响应靶序列，再利用可变区的差异性鉴别菌种。 16SrRNA基因存在于细菌、衣原体、支原体、放线菌等原核生物的染色体基因中，不存在于真菌、病毒等非原核生物中。几乎所有病原菌的16SrRNA基因测序已经完成。 核糖体大小亚基与rRNA之间，以及大小亚基之间，rRNA与蛋白质之间可以自行装配，但详细机理尚未查清，根据目前的研究，至少可以肯定以下事实。 （1）30S亚单位的蛋白专同 16S rRNA结合，50S亚单位的蛋白专同 23S rRNA结合，若将其混合，则装配不成有功能的亚单位。 （2）从不同细菌提取出30S亚单位的蛋白质和16S rRNA，混合后可装配成有功能的30S亚单位，说明无种间差异。 （3）原核细胞与真核细胞的亚单位不能形成有功能的核糖体。 （4）E.coli的核糖体和（玉米中）叶绿体的核糖体相似，相互交换亚单位仍具功能。 （5）E.coli的核糖体和线粒体的核糖体不同，相互交换后不能装配。 三、核糖体蛋白质与rRNA的功能 （一）核糖体上具有一系列与蛋白质合成有关的结合位点与催化位点 （二）在核糖体中rRNA是起主要作用的结构成分 （三）r蛋白质的主要功能 （一）核糖体上具有一系列与蛋白质合成有关的结合位点与催化位点 1.与mRNA的结合位点： 蛋白质的