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利用PCR技术扩增目的基因 主讲人 周洁 深圳罗湖外语学校 内容提要 介绍PCR技术利用的原理、条件和反应过程 1. PCR：多聚酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术 2. 原理：DNA双链复制 温故而知新 DNA的两条链 四种游离的脱氧核苷酸 ATP 解旋酶、DNA聚合酶等 ——体内DNA复制需要的条件 模板： 原料： 能量： 酶： 高温变性（解旋为单链） 低温复性（引物结合到模板链） 中温延伸（Taq酶的作用下合成 与模板互补的DNA双链） 重复循环 3. PCR的反应过程 热稳定DNA聚合酶 20-30个脱氧核苷酸序列 目的基因以指数形式扩增2n 存在的疑问？ —— dATP, dCTP, dGTP,dTTP 知识回顾！ ——ATP 核糖 磷酸 腺嘌呤 磷酸 磷酸 ~ ~ 腺苷（A） 三个磷酸基团 三磷酸腺苷 脱氧 核糖 脱氧三磷酸腺苷 脱氧腺苷（A） —— dATP, dCTP, dGTP,dTTP 磷酸 磷酸 ~ ~ 三个磷酸基团 脱氧三磷酸腺苷 核糖 磷酸 腺嘌呤 脱氧 核糖 脱氧腺苷（A） dNTP 为PCR反应提供原料和能量 腺嘌呤脱氧核苷酸 能量 能量 4. PCR反应需要的条件 模板：DNA的两条链 原料：四种游离的脱氧核苷酸 能量：ATP 酶：热稳定DNA聚合酶 dNTP 引物：20~30个脱氧核苷酸序列 (Taq酶）
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